缩短引物的长度可以降低GC含量,从而提高引物的特异性。你可以根据PCR反应的具体需求,适当调整引物的长度。 重新设计引物 🎨 如果第一种方法不奏效,可以尝试使用其他引物设计软件,比如Primer3或OligoCalc,重新设计引物。这样可以增加引物的特异性,同时降低GC含量。 调整PCR反应条件 🧪 你可以尝试减少PCR循环数,调整扩增...
内容如下：引物GC含量在40%~60%之间,Tm值最好接近72℃。GC含量(composition)过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。
pcr中GC含量过高的问题因为gc之间形成三对氢键解链所需能量较高故模板较难打开在常规变性温度下dna模板变性不完全同时由于单链的gc丰富区易于自身互补配对形成稳定的发夹环二级结构而使pcr引物难于结合到模板上dna聚合酶也难于延伸或停止延伸结果常出现严重的非特异性条带甚至扩增不出靶基因 PCR中GC含量过高的问题 ...
在PCR反应中，引物与DNA模板的配对是基于碱基的互补性。引物中存在连续的A或T碱基，会导致引物在非特定位点上与模板DNA结合，从而产生非特异性扩增。在聚合酶链反应（PCR）中，引物的设计十分关键。引物是PCR反应中用于选择性扩增目标DNA片段的短DNA序列。部分引物设计的考虑因素包括引物长度、碱基组成、GC...
(4PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏引物与模板的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但GC含量高的引物需要设定更高的退火温度。 相关知识点: 试题来源: 解析 答案见上 结果一 题目 4.]PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏引物与模板的碱基...
C.若退火温度过高,则会破坏引物与模板的碱基互补配对 D.长度相同但GC含量高的引物需要设定的退火温度较低 试题答案 在线课程 【答案】ABC 【解析】 PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,利用的原理是DNA复制,需要条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq...
百度试题 题目___一般为40-60%,过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。相关知识点: 试题来源: 解析 4 、引物序列的 GC 含量 反馈 收藏