Spacer 可为寡核苷酸标记提供必要的间隔以减少标记基团与寡核苷酸间的相互作用,主要应用于DNA 发夹结构和双链 结构研究。C3/C6 Spacer 起到增加空间距离的 linker 作用,可以修饰在 5' 端、3' 端以及中间,并且中间可以修饰多个, 当修饰在引物 3' 端时,能够起到阻止DNA 聚合酶延伸的封闭作用。PC(Photo-Cleavable)...
修饰引物/探针系列详解—间臂修饰 间臂修饰又称Spacer ,大部分Spacer由直碳链或乙二醇组成,将Spacer引入到寡核苷酸中,通常是为了在寡核苷酸之间或寡核苷酸与其他官能团之间建立一段距离,以避免空间位阻、减少基团之间不利的相… 阅读全文 赞同 5 ...
化学连接修饰引物是一种功能化的核酸分子，它包含有不同的化学官能团，如羧基、氨基、醇基、炔基等，可用于构建高效的化学标记、交联、双靶点识别和药物输送系统等。这些官能团可以用于与其他化学分子进行特异性的反应，使其能够在生物学、生物化学、药物学和材料学等领域中发挥作用。图1. 常见修饰位点 在一篇哺乳动物...
1、价格更高，合成修饰引物需要的修饰原料稳定性较差，合成偶联时间长，效率低，最后得到的产量自然低于一般的引物。修饰引物通常需要HPLC纯化，纯化过程损失大，而且修饰引物使用的原料价格高于一般引物原料很多倍，所以修饰引物的价格更高。2、周期更长，合成修饰引物一般需要在合成过程中或者合成结束添加修饰基团，相较普...
一、什么是修饰引物？普通引物由脱氧核苷酸构成，修饰引物在特定位置添加化学基团。常见修饰包括5’端荧光标记、3’端磷酸化修饰、内部硫代磷酸键等。例如FAM荧光基团能使PCR产物带荧光信号，便于后续检测。这些修饰不改变引物与模板结合能力，但赋予其新特性。二、修饰位置影响引物功能吗？5’端修饰最常用，因为Taq酶...
引物修饰的主要类型 标记修饰 标记修饰,如同给引物穿上了一件“荧光衣”,使其在实验中更加显眼。其中,荧光标记修饰是最常见的应用之一。以实时荧光定量PCR(qPCR)为例,科学家们将荧光染料如SYBR Green或TaqMan探针连接到引物上,当PCR扩增进行时,荧光信号会随着DNA链的增长而增强,从而实现对目标序列的实时监测和定量分...
硫代修饰的寡核苷酸主要用于反义实验中防止被核酸酶降解。 您可以选择全硫代,但随着硫代碱基的增加,寡核苷酸的Tm值会降低,为了降低这种这种影响, 可以对引物两端2-5个碱基进行硫代修饰,通常可以选择5'和3'各3个碱基进行硫代修饰。 磷酸化(Phosphorylation): ...
探针退火时，应尽可能接近上游引物，同时又不重叠，离上游引物的3'端至少相差一个碱基；如果Taqman探针是用于检测等位基因或突变位点,则应将错配核苷酸放在探针中间，不能放在末端。●纯化方式 建议选择HPLC纯化。TaqMan探针荧光选择 TaqMan探针保存注意点 TaqMan探针必须避光保存，避免荧光基团降解，干粉可于-80℃保存一年...
1.避光保存：许多间臂修饰引物容易受到光的影响而降解，因此应避光保存。2.冷藏保存：间臂修饰引物应该储存在冷藏室或冰箱中，通常在-20℃或更低的温度下保存，以避免降解和氧化。3.干燥保存：间臂修饰引物应该储存在干燥、密封的容器中，以避免湿气和氧化对其产生影响。4.避免反复冻融：间臂修饰引物的冷藏温度不...