加入红细胞裂解液重悬,轻弹管底,混悬细胞沉淀,静置5min后,加入10 mL 冰PBS进行洗涤,4°C,1500rpm/min离心5min,弃上清(必要时重复,直至细胞团块红色部分明显减少),用冷的配置好的骨髓巨噬细胞诱导培养基重悬,铺板。 细胞培养期间,每隔2-3天更换新鲜骨髓来源巨噬细胞培养基,加入培养基前用PBS清洗细胞,培养7天后...
无菌条件下剪开小鼠腹部皮肤显露胸腹部，用无菌止血钳提起剑突处组织，无菌剪刀在该处剪开约1mm2小口。注意止血钳保持提起状态，用无菌巴氏吸管从腹腔开口深入腹腔，反复冲洗腹膜腔灌洗液2次，可回收约8mL 淡黄色灌洗液。五、巨噬细胞的纯化与培养 将每只小鼠的灌洗液于常温条件下1000r /min 离心10min，所得细胞...
黏附法是一种简单有效的巨噬细胞提取方法。将采集到的外周血直接加入无血清培养基中,并将细胞悬浮液加入黏附性培养皿(如塑料培养皿或玻璃培养皿)中。将黏附的巨噬细胞培养在37摄氏度的恒温箱中,因为巨噬细胞具有黏附性,它们会附着在培养皿上。借助黏附性,可以使巨噬细胞从其他细胞中分离出来,最终得到纯净的巨噬细...
外周血巨噬细胞提取的方法主要包括血样品的稀释、离心、去除血清、裂解红细胞、洗涤巨噬细胞和培养等步骤。这种方法可以方便地从外周血样品中提取和培养巨噬细胞,为研究和诊断提供了重要的实验材料。请注意,在进行任何实验操作之前,务必遵守相关的生物安全和伦理规定,并严格遵循实验室安全操作规程。©...
腹腔巨噬细胞提取方法：腹腔巨噬细胞天然存在于小鼠腹腔，可用生理盐水或细胞培养基冲洗腹腔后抽取腹腔灌洗液体，即可获取巨噬细胞。具体实验方案包括：（1）巨噬细胞的诱导：连续3天给小鼠腹腔注射1mL的3%巯基乙酸盐肉汤，促进巨噬细胞的聚集。（2）3天后，收集巨噬细胞：处理小鼠，暴露腹膜，向腹腔注射...
常用的检测方法如下。单核细胞渗出血管，进入组织和器官后，可进一步分化发育成巨噬细胞，成为机体内吞噬能力最强的细胞。巨噬细胞在不同组织中的名称不同：在肺里称“肺巨噬细胞”；在神经系统里称为“小神经胶质细胞”；在骨里则称为“破骨细胞”。单核-巨噬细胞是对他们的统称。
04巨噬细胞的收集准备75%乙醇,以脱颈方式处死小鼠,浸泡3min。取出,置于无菌操作台,仰卧位固定小鼠,右手持注射器于右下腹部将针头刺入皮下进入腹腔,将5mL预冷的PBS(培养液组为5mL预冷的10%血清RPMI 1640培养液) 注入腹腔,按摩小鼠腹部5min。无菌条件下剪开小鼠腹部皮肤显露胸腹部,用无菌止血钳提起剑突处组织,...
本文将介绍几种常用的外周血巨噬细胞提取方法,包括密度梯度离心法、附着法、负选择法和磁珠分选法。 一、密度梯度离心法 密度梯度离心法是一种常用的外周血巨噬细胞提取方法。首先,将外周血样品与等体积的生理盐水混合,然后缓慢倒入离心管中。接下来,将离心管放入离心机中进行离心,离心速度和时间要根据具体实验要求来...
巨噬细胞提取方法我是按照经典的方法,注射淀粉肉汤3天后腹腔灌洗得来的,培养3小时除去上清液后纯化了巨噬细胞然后加药的,培养24小时后可以看到细胞已经贴壁了,但是我发现加了LPS的组细胞悬浮的比阴性组多,这个就很奇怪了,我的LPS浓度从10ng一直到20ug/mL都有设置,但是吞噬率无一超过阴性组的。 (1)小鼠2 ml/只...
本发明利用经解离后的动物结肠提取结 肠固有层巨噬细胞,依次包括酶解、差速离心和 Percoll溶液密度梯度离心,收集得到含有巨噬 细胞的细胞相。本发明还提供了对固有层巨噬细 胞的纯化方法,采用流式分选的方法对细胞相的 悬液进行分选,分离的结肠固有层免疫细胞分群 A 明显,并可对不同类型的巨噬细胞进行区分。本 ...