4.配置各种分化培养基(用24孔板进行分化培养,每个孔加入1ml培养基) (1)Th1:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul IL-12,10.3ul IL-4抗体; (2)Th2:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul IL-4,11.5ul IFN抗体; (3)Treg:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul TGF-β; (4)Th17:10ml基...
将MS柱置于合适的MACS分离器的磁场中。 用0.5 mL MACS buffer润洗MS柱。 将细胞悬液缓缓加入柱子中。 用0.5 mL MACS buffer润洗MS柱两次。 从分离器中取出MS柱,并将其放在合适的收集管中。将1 mL MACS buffer加到MS柱上,立即冲走磁性标记的CD4+T细胞。 03流式分选naive CD4+ T细胞 4℃,500 g/10 min离心。
手把手教学|小鼠脾脏naive CD4+ T细胞的分离和原代培养#小鼠 #naive #细胞分离 #原代培养 #实验外包 - eRebri医瑞贝-小H于20240928发布在抖音,已经收获了9个喜欢,来抖音,记录美好生活!
将细胞保持在冰上并保护免受光照直到分选结束。 5、在分选仪兼容的收集管中,加入1-2ml完全RPMI培养基或FBS。 6、分选出CD4+CD25-CD62L+CD44-群体,即为初始CD4+T细胞。用完全RPMI培养基洗涤收集的细胞,如前所述离心。 7、将沉淀...
该应用方案描述了可靠和高效的小鼠TH细胞分化的完整工作流程,从单细胞制备开始,然后分离初始CD4T细胞并体外激活和分化,通过综合细胞分析。 我们证明,在TexMACS™培养基中存在的体外TH细胞分化的各种TH亚群中特征效应细胞因子的表达水平高于RPMI1640。 01. 小鼠脾脏单细胞悬液制备 ...
.11小鼠CD4+记忆性T淋巴细胞的产生、纯化、鉴定及皮肤移植的检测朱鹏陈义发李丹陈孝平【摘要】目的建立CD4记忆T细胞(memoryTlymphocytes,Tm)的免疫磁珠分离方法,并检测其体外部分功能。方法借助小鼠皮肤移植模型,制备受鼠脾细胞悬液,运用免疫磁珠方法分离CIMTm,用台盼蓝染色法和流式细胞仪检测分选所得细胞的活性和纯度...
10. 根据实验需要洗涤细胞后,将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验. 图1. 本产品分选效果图 从C57BL/6小鼠脾脏细胞中分选CD4+ T细胞,分选前后的细胞用FITC anti-mouse CD4抗体(克隆号GK1.5)标记后进行流式 细胞仪分析,分选前后的CD4+ T细胞纯度分别为20.3%和98.8%. 注意...
CD4^+T细胞小鼠目的 建立一种可靠的哮喘致敏小鼠模型及分离脾脏CD4+ T细胞.方法 采用卵蛋白致敏的方法建立模型 ,运用panning法分离CD4+ T细胞.结果 此模型小鼠肺组织呈现典型的哮喘样病理改变 ,其外周血,支气管肺泡灌洗液 (BALF)中嗜酸性粒细胞百分比 (EOS % )显著高于正常对照组 (P 0 .0 1 ).CD4+ T细胞...
无需分离柱:使用磁分离器快速分离细胞,无需使用分离柱; 高纯度:可获得纯度超过 97% 的分选细胞; 高活性:分选后的细胞不含抗体和磁珠标记,并保留高活性和功能性以用于下游实验。操作说明:以分选小鼠脾脏CD4+ T细胞为例1. 制备小鼠脾脏单细胞悬液:在 70 μm 细胞筛网上研磨脾脏,以预冷的 PBS 冲洗细胞筛网,收...
摘要 本发明属于细胞分选领域,具体是一种分离提纯小鼠肿瘤组织浸润CD4+CD25+调节性T细胞的分离纯化方法。具体包括以下步骤(1)肿瘤组织单细胞悬液的制备称取肿瘤组织0.2g,剪成小块后放入组织研磨器内,加入5mL组织匀浆液0℃匀浆2min,经200目滤网过滤,收集滤液,250g 20℃垂直离心机内离心15min,弃上清留沉淀,用2m...