BMDM:bone marrow derived macrophage是原代巨噬细胞,在炎症细胞模型及肿瘤研究方面应用较多,可以很好的探索巨噬细胞生物学特征。但是目前获取它的方法没有统一的方案,大家都有很多疑惑或者问题。要么易被污染,要么获取密度不够,要么极化不起来,等等挺多问题。作者自己摸索的方案,感觉效果不错,第七天后,用流式标记F4/...
首先,获取小鼠的骨髓细胞。通常从小鼠的股骨和胫骨中抽取骨髓。在无菌条件下,小心地分离小鼠的股骨和胫骨,去除周围的肌肉组织,用无菌的注射器吸取适量的培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液。将收集到的骨髓细胞接种到培养瓶或培养板中,加入含有特定细胞因子的培养基。一般来说,常用的细胞因子是巨噬细胞集落刺激...
评价:在原代巨噬细胞的获取中,直接分离的腹腔巨噬细胞或者肺泡巨噬细胞数量有限,在未经诱导时,每只小鼠只能获取1.5-3×106个腹腔巨噬细胞,不能满足某些实验的需求,因此骨髓诱导分化的巨噬细胞(BMDM)依旧是目前实验室最常用的分离小鼠...
冲洗骨髓:将骨髓冲洗到细胞培养皿中,配好的DMEM(细胞培养处理,直径10厘米),每根骨头缓慢注射约2-3毫升DMEM,直至骨髓腔变白。确保DMEM不回流,以避免污染。培养基为DMEM+10%FBS+1%双抗+100 ng/mL M-CSF。🧪 提取骨髓巨噬细胞BMDM需要一定的技巧和耐心,但通过以上步骤,你可以成功获得大量的BMDM细胞,用于科研实验。
这些结果表明,Sptlc2对于LPS诱导的M1样巨噬细胞生长、形态变化和代谢适应性是必需的。 为了研究Sptlc2充足或Sptlc2缺乏的巨噬细胞中的鞘脂谱和合成,作者用13C315N1 L-丝氨酸培养Sptlc2充足或Sptlc2缺乏的巨噬细胞2小时,然后测量示踪剂掺入鞘脂的情况(图2e)。在Lyz2-cre BMDM中,几乎所有测量的内源性和稳定...
BMDM小鼠骨髓源性细胞培养 提取完成的单核细胞在10cm中皿培养过夜(提取步骤在前面),第二天早上需要将细胞铺于6孔板或者12孔板。一般来说,一只小鼠的腿骨细胞可以铺四块6孔板或者六块12孔板。首先解冻一管L929细胞(L929细胞的培养在之前也有讲过),大约10 ml左右。解冻期间拿出昨天提取的小鼠单核细胞,收集上清,1700...
巨噬细胞在 37°C 下生长 7 天,每两天取出培养基并更换为新鲜的BMDM培养基。一周后巨噬细胞的纯度可达到98.6%。 此时,巨噬细胞达到了足够的纯度,就可以用以下方法将其诱导为M1或M2: •IFN-γ(20 ng/ml)和 LPS(100 ng/ml)诱导为M1•IL-4 (20 ng...
小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)在免疫学、细胞生物学等研究领域中具有重要的应用价值。以下是小鼠 BMDM 巨噬细胞的培养方法。 首先,获取小鼠的骨髓细胞。通常从小鼠的股骨和胫骨中抽取骨髓。在无菌条件下,小心地分离小鼠的股骨和胫骨,去除周围的肌肉组织,用无菌的注射器吸取适量的培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液。
中文名称:BMDM小鼠骨髓巨噬细胞膜包覆纳米载体 英文名称:BMDMbonemarrowmacrophagemembranecoatednanocarrier 规格:2mL;5mL;10mL 产品说明:平均粒径150nm;视不同种生物膜包覆使载体具备长循环及靶向功能 包装容器:西林瓶/塑封瓶 主要组成:细胞膜组分(真核或原代细胞)、高分子内核材料、功能因子 薄膜包覆法:薄膜...
上海交通大学研究团队在探究糖酵解重编程在调节巨噬细胞极化和细胞焦亡背后的具体机制相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向糖酵解途径中必需的酶PGK1 的siRNA转染到小鼠骨髓源巨噬细胞(BMDM)中进行敲低实验。Western blotting的结果显示,转染后BMDM细胞中PGK1蛋白的表达与对照组相比可被敲低50%以上。