处死小鼠:通过颈椎脱臼法处死小鼠,剃除腹胸部的被毛,然后放入装有75%酒精的烧杯中浸泡5分钟。 打开胸腔:在无菌环境下打开小鼠胸腔,取出心脏组织,并将其放入盛有无菌1×PBS的培养皿中,洗净表面的血液。 消毒处理:将心脏组织转入装有75%酒精的培养皿中浸泡15秒,以杀死大多数心脏被膜细胞,然后立即转入装有无菌1×P...
由于心肌细胞和心肌成纤维细胞在细胞分离后贴壁存在时间差,通过差速帖壁法获取心肌细胞。 材料准备 动物:SD大鼠,取出生1-3天20只乳鼠的心脏(雌雄不限,最好是1天的,细胞的分化增殖能力强,适于作各种研究)。 试剂:胎牛血清;DMEM培养基;0.25%胰蛋白酶;Ⅱ胶原酶;台盼蓝;5-溴脱氧尿嘧啶核苷。 配液 完全培养基:...
分离的P1 CM检测,约84%的细胞为α-actinin^+(图2)。 图2 P1小鼠CMs的分离 2.3 P4和P7小鼠CMs的分离 Gentle MACS方法分离P4和P7小鼠心脏,然而,获得的CMs细胞活力较低,杆状细胞较少。因此,采用另一种方法Langendorff-free perfusion method分离P4和P7小鼠心脏。 2.3.1 采用Langendorff-free法分离P4和P7小鼠CMs (...
小鼠心肌成纤维细胞分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。 一、细胞简介平台编号: Bio-73829规格:1×10⁶Cells/T25培养…
分离 1. 小鼠心肌细胞的分离 小鼠腹腔注射肝素(5000IU/kg),20min后行颈椎脱臼断离脊髓处死。迅速开胸摘取心脏,置含10mmol/LNaHCO3,10mmol/LHEPES,10mmol/LBDM,pH7.20~7.30的Joklik’sMEM培养液(A液)中清洗血液,清理残余肺叶与多余的脂肪组织,迅速行主动脉插管。将心脏悬挂于Langendorff灌流装置上,0号丝线扎紧...
分离小鼠原代心肌细胞 与大鼠原代细胞分离有所不同 方法: 1、所有器械(四把镊子两把剪刀)放在75%酒精中浸泡6 h以上。 2、用PBS溶液(过滤灭菌)配制0.075%胰酶20mL备用(胰酶原液0.25%,6ml原液可以稀释至20ml)。 3、新生(1天)乳小鼠15-20只,器械在酒精灯上灼烧消毒备用。 4、准备两个冰盒,在其中一个冰盒中放...
小鼠心肌成纤维细胞最常用的分离方法有两种,一种是贴块法,一种是消化法,这两种方法都可以用于分离和培养原代细胞。 一 需要准备的实验器材 1. 培养皿 2. T-25细胞培养瓶 3. 100目不锈钢网筛 4. 200目不锈钢网筛 5. 眼科剪 6. 眼科镊 7. 离心管(15ml、50ml) ...
新生小鼠原代心肌成纤维细胞的分离与培养分享 2024年5月9日,周四,公司组织,由实验室主管刘博主导,实验室全体成员参与,对新生小鼠原代心肌成纤维细胞的分离与培养的相关知识点,进行了培训与交流。本次会议,主要针对新生小鼠原代心肌成纤维细胞的分离与培养,就以下内容展开了交流:...
P1期（出生后第1天）的CMs采用Gentle MACS方法，通过新生期心脏分离试剂盒温和快速分离。Gentle MACS处理后，细胞产量高，存活率接近96%，形态为梭形多边形。对于P4和P7期，Gentle MACS方法效果不佳，转而使用Langendorff-free灌注法，尤其适合P4和P7小鼠的心脏。这种方法通过缓慢注入缓冲液，获得高活力的...
小鼠心肌细胞(新生)分离培养试剂盒包含: (1)小鼠心肌细胞(新生)分离培养组织处理缓冲液(500ml) (2)小鼠心肌细胞(新生)分离培养组织解离缓冲液(100ml) (3)小鼠心肌细胞(新生)分离培养组织解离液(5×1ml) (4)小鼠心肌细胞(新生)培养添加剂(5×200μl) ...