1按小鼠数量配制组织消化液,试剂比例如下: 注:组织消化液现用现配,充分混匀后使用。 2向每个含有小鼠组织样本的EP管中加入100 μL新鲜组织消化液,55℃水浴中消化15 min。组织消化时,务必将组织完全浸没于消化液中。消化完成后,组织外观上仍然完整,但足量的基因组DN...
2.基因型鉴定的原理。 基因型鉴定是通过PCR(聚合酶链反应)或其他分子生物学方法检测小鼠基因组中特定基因的存在与否。全基因敲除小鼠的基因型鉴定通常包括以下几个步骤: 2.1 DNA提取。 首先,从小鼠组织(通常是尾部)中提取DNA样本。这一步骤至关重要,因为它决定了后续PCR反应的成功率和准确性。 2.2 PCR反应。 利用...
在做完基因型鉴定之后要尽快把不需要的小鼠处死,因为小鼠太多雌鼠会奶水不足,当雌鼠奶水不足时,会吃掉鼠崽。 小鼠基因型鉴定 配方: bufferA 0.5meDTA(ph8.0) 10mol/Lnaoh 双蒸水定容到250mL 室温储存100uL625uL bufferb Tribase 浓盐酸调ph到3.0
因此,对转基因小鼠必须进行鉴定筛选。 1.转基因整合检测 鉴定转基因小鼠最简单的方法是从小鼠尾尖提取基因 组DnA,检测 其基因型。检测方法包括pcR和shouthern杂交。 (1)基因组DnA的提取: 1)将离乳期小鼠(>4周龄)麻醉标记。 2)用一只手抓住小鼠,另一只手持消毒剪剪下约1cm...
为小鼠太多雌鼠会奶水不足,当雌鼠奶水不足时,会吃掉鼠 小鼠基因型鉴定 配方: bufferA 0.5meDTA(ph8.0) 10mol/Lnaoh 双蒸水定容到250mL 室温储存100uL625uL bufferb Tribase 浓盐酸调ph到3.0 室温储存40mm 步骤: 1.小鼠出生7天后剪尾巴(一小点就行),若出生30天后剪耳朵; 2.75uLbufferA100C煮40min,每20...
小鼠基因型鉴定原理 小鼠发育阶段特点 出生为红色(若要换窝,要带一点周围的木屑,否则鼠妈不认识)→生后4-5天开始长毛→生后7天剪脚趾和剪尾巴做基因型鉴定→生后10天开眼→生后20天断奶→生后40天可以合笼→怀孕20天后产崽。 小鼠性别判断。雌鼠的后腹部左右两侧有明显