电转化:1 向感受态细胞中加入约510ug(体积小于10 ul)的DNA,用枪吹吸均匀,转移至预冷的电转杯中,静置5min;2 擦干电转杯,电击,电击参数:1.5KV,25uF,200欧姆;3 立即加入1ml 预冷的山梨醇,转移至EP管中,于30静置1h;4 离心,弃上清,加入1mL YEPD后,于30、200rpm培养2h;5 离心得菌体后,吸除550 ul...
实验总结的几种高效酿酒酵母转化方法 电转法 设计方案一: 感受态制备: 1.挑一环酵母菌接种于5mL YEPD培养基中,30℃、250-300rpm培养过夜; 2.取1mL一级种子分别接种于两瓶50mLYEPD培养基中,30℃、250- 300rpm培养约16-18h(OD: 1.3- 1.5); 3.于4℃离心收集菌体,用25mL冰无菌水洗涤一次后,细胞用10ml冰...
酿酒酵母分离纯化的实验设计 热度: 电转法 设计方案一: 感受态制备: 1.挑一环酵母菌接种于5mLYEPD培养基中,30℃、250-300rpm培养过夜; 2.取1mL一级种子分别接种于两瓶 300rpm培养约16-18h(OD: 1.3- 1.5); 3.于4℃离心收集菌体,用25mL冰无菌水洗涤一次后,细胞用 ...
醋酸锂转化法 方案一: 1.挑一环酵母菌接种于5mL YEPD培养基中,30℃、200rpm培养过夜; 2.取1mL一级种子分别接种于两瓶50mL YEPD培养基中,30℃、250-300rpm培养约5h(OD:0.5-0.8); 3.于4℃,5000rpm,5min离心收集菌体; 4.25mL冰无菌水洗涤两次,离心条件一样; 5.用1mL 0.1MLiAc悬浮,离心收集菌体; 6...
醋酸锂转化法 方案一: 1.挑一环酵母菌接种于5mL YEPD培养基中,30℃、200rpm培养过夜; 2.取1mL一级种子分别接种于两瓶50mL YEPD培养基中,30℃、250-300rpm培养约5h(OD:0.5-0.8); 3.于4℃,5000rpm,5min离心收集菌体; 4.25mL冰无菌水洗涤两次,离心条件一样; 5.用1mL 0.1MLiAc悬浮,离心收集菌体; 6...