所以,实时荧光定量 PCR,它不仅可以用 cDNA 作为模板,也可以用基因组 DNA 等作为模板。 有时候搞清楚这些概念也很重要,你分清了吗?
RT-PCR有两种解释，一是指Real Time-PCR，即实时PCR；另一种是指Reverse Transcription-PCR，即反转录PCR。要判断文献中所说的RT-PCR是指实时PCR还是指反转录PCR，可以看反应体系中的模板，如果是DNA或cDNA，那就是指实时PCR；如果是mRNA，那就是指反转录-PCR。Real Time-PCR既可以定性又可以定量，...
5年经验总结:荧光定量 PCR实操技术 回想我刚进入实验室的时候就接触到了荧光定量PCR,作为一个刚毕业的小白,面对一堆名词,哑巴吃黄连,有苦说不出,一头雾水。扩增曲线、标准曲线、域值、CT值、熔解曲线、基线到底都是什么意思?那些荧光图色彩斑斓的很漂亮但是我好像不认识它? 吾日三省吾身,定量实验做对照了吗?今...
如何建立可靠地实时荧光定量RT-PCR方法检测新型冠状病毒 2019年末,中国爆发新型冠状病毒感染性肺炎,对人们的生命健康造成了巨大的威胁。因为该新冠状病毒传染性强,且爆发于平时流感爆发的冬季,所以明确感染者的病原学诊断,以及随后采取必要的隔离措施,对此次疫情的预防和控制十分重要。 现有第五版新型冠状病毒感染的肺...
粤语版 拆解～德国Carl Zeiss 卡尔蔡司显微镜Axio Observer自动聚焦控制系统Definite Focus嵌入式系统CAN Bus总线通信控制 1977 3 24:44 App 第二集 居然80年代就有可以称1微克的秤子。 实验室微量天平⚖️拆解 2519 3 6:22 App 俗称飞机黑匣子的两部飞行数据记录仪到齐了一个FDR 1983年产另一个CVR 1967年制...
但是大家知道吗? 在很久很久以前,除了加样之外,PCR检测是全程靠双手去做的。直到1996年,Real Time Quantitative PCR的发表标志着qPCR的诞生。它引入了荧光标记的水解探针,并在每个PCR循环的延伸结束后采集荧光信号,将到达指数扩增期所需的循环...
还有人告诉我说,做荧光定量PCR的引物和普通PCR的引物都不一样,如果是这样,实时荧光定量PCR体系的条件和普通PCR的还能一样吗?应该是不相干的了。3、我后续的实验是做荧光定量PCR,染料法或探针法应该如何选择?各有什么优缺点呢(经济、效能、准确、简便等方面)?A:是基本不相关了,特别是使用探针的定量PCR,通常把...
Q：现在已经提取出总RNA了，需要做逆转录成cDNA，然后再做荧光定量PCR来观察基因表达量的多少。在这个实验中逆转录时的引物可以直接用荧光定量PCR的引物吗？还是有什么特殊的要求呢？A：如果是两步法做的话，反转录通常用的是随机引物或者oligoT,这样当然是无法用于PCR步骤的，需要重新选定基因特异性引物。为了避免RNA...
2013,47(4):1—5/孙庆歌,等中国兽药杂志血清3型鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量RT—PCR检测方法的建立与初步应用孙庆歌,薛霜,肖爱芳,马慧慧,朱薇,漆世华,温文生,舒银辉,谢红玲,苏敬良(1.武汉中博生物股份有限公司,武汉430070;2.中国农业大学动物医学院人畜共患病农业部重点开放实验室,北京10019)[收稿日期]2012—10...
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