根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。 若一抗是鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗 (山羊抗小鼠或兔抗小鼠等)。 在特殊实验中,如双标实验,若一抗分别为兔源和鼠来源的,则相应的二抗应同时为抗兔和抗鼠,可选用驴来源的二抗。 ②抗体亚型 多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,相应二抗应为抗IgG抗体...
二抗的选择 1、特异性匹配一抗 宿主物种匹配:二抗是针对一抗的宿主物种产生的。例如,如果一抗是兔源性的,那么二抗应该是抗兔的抗体,如羊抗兔IgG。确保二抗能够特异性地识别一抗,这是准确检测目的蛋白的关键。抗体类型匹配:一抗主要是IgG、IgM 等类型,二抗要与之匹配。一般 Western blot 实验中常用的一抗...
划重点如何挑选二抗! 二抗要有两个条件: 1.跟一抗的种属对应,例如一抗是兔抗,那么对应二抗应该是抗兔,可以是羊抗兔,也可以是鼠抗兔,比较拗口,即一抗的种属决定二抗的反应性; 2.耦合的荧光染料或者发光生物素的激发光波长要求不一样,常见的有555和488,还有647; 免疫荧光的原理就是一抗定位,二抗结合一抗并且...
根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。如果一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。 (2)一抗是属于哪个类或亚类 除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配...
一般会根据一抗的种属来源来选择相应的抗该物种的二抗。比如:一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则应该是抗小鼠的二抗(山羊或是兔抗小鼠)。 (2)抗体亚型 多克隆抗体一般主要是IgG类免疫球蛋白,相应的二抗为抗IgG抗体;单克隆抗体由于存在不同的亚型和类别,选择二抗时需要根据一抗的类型或亚类相匹配。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗),如下图是直标一抗。 二抗的作用 一抗是特异性的结合目标蛋白,一抗需要发光物质或者显色基团标记才能被检测出来,否者一抗和蛋白的结合与否用肉眼是看不出来的。但是一抗往往比较特异每个都标记成本很高,通常会使用标记二...
如何选择一抗和二抗?如何选择⼀抗和⼆抗?1. ⼀抗选择 (1)确定抗体的名字,注意中英⽂名字、别名、亚型等信息。(2)确定您的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,或者是FACS。⼀般抗体说明书都会列出抗体经验证过适⽤的实验类型,如果抗体说明书没有提及的应⽤类型,并不意味着该抗体不适⽤于此种...
根据实验需求选择。三、二抗的选择 选择二抗时,考虑以下要点:1. **种属来源**:根据一抗的物种选择相应的二抗(如抗鼠、抗兔等)。2. **抗体亚型**:选择与一抗类型相匹配的抗体亚型。3. **完整片段或抗体片段**:根据实验需求选择完整抗体或片段(如Fab、F(ab’)2)。4. **偶联标记物**...
对于一抗为单克隆抗体的情况,其同型(Isotype)通常会在产品信息中给出,如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype:IgM),那么相应的二抗就应该选择抗小鼠IgM。此外由于抗IgG抗体可以识别大多数类型的免疫球蛋白,所以在不清楚一抗同型的情况下,可以选择抗IgG的二抗。如果单克隆一抗为小鼠IgG的某一亚类,...
二、如何选择适合实验的正确二抗1. 匹配一抗的物种来源首先,选择二抗时需确保其能够特异性地识别并结合实验中使用的一抗。由于一抗通常来源于不同的动物(如兔、鼠、羊等),因此二抗的选择必须基于一抗的物种来源。例如,如果一抗是兔源的,则应选择能够识别兔抗体的二抗。2. 考虑检测系统的兼容性不同的检测...