最终灰度值要根据内参基因来计算。比如说,你先用PS测量出内参基因(比如tubulin)的灰度值,再测量出目的基因的灰度值。计算公式是:最终灰度值=(目的基因条带灰度值-空白值)/(内参基因条带灰度值-空白值)。 ⚠️注意事项 每个泳道都应测量一个空白值。 WB一般要做三次重复,这样才会有三个最终灰度值,可以进行差...
最后在于计算,我们将每个条带的 “平均值” 减去 背景的 “平均值”,得到了实际的平均值,再乘以总面积就得到了该条带的总灰度值,我们将第一个条带设置值为1,得到其他条带相对条带1的值,并作图: 通过上面的柱形图和实际western blot条带目测比较,基本符合实际情况。 假设我们没有去背景会是什么样的情况呢: ...
1 ImageJ是一款十分良心的软件，直接可以官网上下载~下载完点击打开。2 打开保存的WB条带图，注意要截图哦，截图到ppt上或者word上。3 按ctrl+c键复制图片，ctrl+v键粘贴到ImageJ上面去。4 更改图片格式，选8bit 5 用方框把想要计算的那条条带框起来。6 选择“分析”，选择第一条条带。7 选择完之后，条带...
Western blot是显示蛋白丰度相对变化的 半定量方法, 通过分析信号强度,可以确定样本中目标蛋白 的表达量相对于其它样本(如对照组、模型组)是增加还是减少。 今天就把完整的WB定量方法及定量软件具体…: 科研的小伙伴们,你是不是正在经历这样的场景开开心心的入学、认