27. 将扩增后的稳定敲除细胞进行冻存。 服务推荐 凭借多年的经验和稳定的平台,安必奇生物科技提供各种CRISPR/Cas9相关服务,以帮助您在不同阶段进行基因编辑。我们的服务涵盖sgRNA设计、转染、筛选,再到最终细胞系。我们的服务包括细胞系定制服务,细胞永生化服务,微生物基因组改造,植物CRISPR/Cas9基因编辑,植物CRISPR单碱...
找到纯合突变的细胞株,将对应细胞复苏扩繁拿到细胞系,提取蛋白进行敲除基因对应蛋白的定量,验证基因敲除...
在这项研究中,作者在永生化HUVEC细胞系中使用CRISPR Cas9技术将HiBiT标签蛋白敲入E-选择素的N端,同时外...
高效:慢病毒转导可以高效地递送gRNA和Cas9到多种类型的细胞中,包括那些难以转染的细胞,即使是最难转染的细胞系(包括分化神经元),递送效率也很高。 稳定性:由于慢病毒可以整合到宿主细胞的基因组中,因此可以长期稳定表达gRNA和CRISPR Cas9。 慢病毒转导的缺点 安全性考虑:使用慢病毒转导涉及到潜在的基因组整合风险,可...
你可以选择用PEG(聚乙二醇)来导入CRISPR组分并瞬时表达,但这种方法仅限于原生质体细胞,也就是细胞壁被去除的植物细胞。你也可以选择农杆菌介导的导入,它利用农杆菌作为载体,将你感兴趣的基因导入目的细胞。Johannes Stuttmann实验室提供了pDGE Dicot Genome Editing Kit,包含了各种带有Cas9且与农杆菌兼容的载体。
02 利用CRISPR-Cas9技术寻找联合靶点 通过sgRNA文库筛选,发现那些经过药物处理后消失的sgRNA,进而发现对药物处理敏感的敲除基因。例如,利用CRISPR文库筛选发现在胰腺癌细胞中敲除某些基因后,胰腺癌细胞会对MEK抑制剂敏感。 反过来,也可以利用CRISPR文库筛选给药处理后被富集起来的sgRNA,进而研究其耐药性机理。例如Hou等人通过...
首先,敲除了三个基因的T细胞的癌症细胞杀伤能力更强了。同时,敲除了三个基因的T细胞在人体内的稳定性...
在生活中,我们经常听到关于“老年痴呆”的案例,许多家庭都因此而苦恼。随之而来的,是怎样保持大脑年轻和活力的迫切需求。让我们回到这项新的研究,研究者们通过CRISPR-Cas9技术,设计了一个高通量基因筛选平台,能够检测哪些基因的敲除能够促进时衰老的神经干细胞的活化。
高效:慢病毒转导可以高效地递送gRNA和Cas9到多种类型的细胞中,包括那些难以转染的细胞,即使是最难转染的细胞系(包括分化神经元),递送效率也很高。 稳定性:由于慢病毒可以整合到宿主细胞的基因组中,因此可以长期稳定表达gRNA和CRISPR Cas9。 慢病毒转导的缺点 ...