3"-磷酸腺苷-5"-磷酰硫酸(PAPS)是目前发现的唯一的"活性"硫酸基团供体,在生物肝素酶法硫磺化反应中起到重要作用,但化学合成的成本高.如何大量低成本制备PAPS是实现酶法合成肝素工业化的关键因素.本文克隆表达了酶法合成PAPS的两个酶:三磷酸腺苷(ATP)硫化酶和5"-腺苷磷酰硫酸(APS)激酶.构建了一条体外合成PAPS...
本文克隆表达了酶法合成PAPS的两个酶:三磷酸腺苷(ATP)硫化酶和5’-腺苷磷酰硫酸(APS)激酶。构建了一条体外合成PAPS的途径。首先利用ATP硫化酶将ATP转化生成APS,同时产生副产物无机焦磷酸(PPi),APS再在APS激酶作用下转化生成PAPS。研究了Mg2+浓度、缓冲体系和p H、温度以及无机焦磷酸水解酶(PPase)的添加对该酶...