在我个人的使用中,我仅在传统免疫组化出现背景强,难以标记的情况下,才会考虑TSA染色。因为TSA染色的荧光孵育步骤其实抗体浓度稀释较宽(1:200-1:3000),有的时候过浓的抗体会带来过强的显色,严重影响统计和分析。另外,在考虑使用TSA染色的场景前,我需要确保一抗首先是好用的,可以先在高丰度的组织切片上确认这一点。最后,如果因为抗体抗性的原
组织多色免疫荧光(mIHC)是一种多标记免疫组化染色方案,它基于酪酰胺信号放大技术(TSA,TyramideSignal Amplification),可以为组织样品特别是石蜡组织样品进行染色。该技术允许同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行多标记复合染色,配合多光谱成像分析系统,可以获得高信噪比的图像,甚至是多达 6 种标记的同步染色和共定位...
一、完美解决荧光双染中一抗来源需不同种属。 二、信号放大,荧光信号放大的倍数大大增强。 三、可以对多种蛋白在同一张切片上进行不同荧光标记,实现多种蛋白共定位。 【TSA技术案例】 快来普拉特泽做多色免疫荧光标记吧,和3D HisTech全景扫描和激光共聚焦更配哦! 激光共聚焦 3D HisTech全景扫描...
https://mp.weixin.qq.com/s/vedQXhy4FGNKCcAGMutiGQ 多色免疫荧光(mIF/mIHC)是研究组织形态和原位蛋白表达的方法,借助该技术可以在一张组织样本上实现多种(>3)分子标记,将多元信息呈现在同一画面内,配合工具定量分析,能够对组织微环境中目标分子或细胞及其相关生物标志物进行全面分析。 近些年,多色免疫荧光(mIF...
与传统多色免疫荧光不同,纳米二抗不仅不要求使用不同种属的一抗,同时每次实验时还可以检测2-3个不同的指标,这极大地缩短了实验时间,即通过一抗和二抗结合达到更快实验速度,这就是“一步法”免疫染色。 一步免疫染色原理是分别将一抗和纳米二抗同时孵育,再使用一抗-...
下篇:TSA多色免疫荧光实验过程中的问题以及解决方法 一、实验前的准备 ▲样本选择与处理:确保样本新鲜,并避免长时间保存导致的抗原降解。样本处理过程中,要保持样本的完整性和抗原活性,切片应均匀、无破损,确保抗原的充分暴露。 ▲抗体与荧光染料的选择: ...
总之,组织多色免疫荧光是一种强大的研究工具,可以用于揭示组织微环境中复杂表型分析,提高对弱信号及不易标记的蛋白的探测灵敏度,并展示组织原位多个蛋白标志物的空间分布。 四,部分实验图展示 五,实验步骤 Step 1:选定待测组织、待测指标; Step 2:组化验证、单色验证; Step 3:多色荧光标记; Step 4:各通道图像...
一,什么是组织多色免疫荧光? 组织多色免疫荧光(mIHC)是一种多标记免疫组化染色方案,它基于酪酰胺信号放大技术(TSA,TyramideSignal Amplification),可以为组织样品特别是石蜡组织样品进行染色。该技术允许同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行多标记复合染色,配合多光谱成像分析系统,可以获得高信噪比的图像,甚至是多达...
多色免疫荧光技术原理 多色免疫荧光技术原理：①多色免疫荧光技术的核心是通过不同荧光染料标记抗体，实现对同一样本中多个靶标的同步检测。每种荧光染料具有独特的激发和发射波长，例如FITC发射绿光，TRITC发射红光，Cy5发射远红光。这些染料与抗体结合后，可分别靶向不同的抗原分子。②实验流程通常包括样本固定、抗原修复...
研究线粒体动态变化需要精准的观察手段,多色免疫荧光技术通过多重标记实现多参数同步检测,这种方法突破了传统单色标记的观察局限,但在实际操作中常遇到荧光串扰、抗体交叉反应等技术痛点。 实验前需明确研究目标,比如同时观察线粒体形态、膜电位变化及特定蛋白定位,这决定了荧光染料组合方案。线粒体膜蛋白TOM20与基质...