摘要:目的 提取并纯化鲍曼不动杆菌(AB)标准株ATCC17978的外膜囊泡(omv),观察其形态、结构并检测其活性.方法 常规培养鲍曼标准株,Optiprep密度梯度超速离心提取并纯化其omv,经负染电镜检测omv形态;BCA法检测omv总蛋白浓度,SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量大小;用纯化的omv和蛋白酶K处理后的omv分别刺激人肺癌上皮细胞A54...
利用超速离心改良法提取外膜囊泡(OMV),然后采用负染法于透射电子显微镜下观察其形态和大小,通过Stewart磷脂分析法进行相对定量,并采用两独立样本t检验进行两组间比较。
结论 纯化的鲍曼不动杆菌的omv为10～200 nm的双层囊泡结构,内含多种毒力蛋白,能刺激人肺癌上皮细胞A549产生IL_8。[关键词]鲍曼不动杆菌;外膜囊泡;负染电镜;白细胞介素一8[中图法分类号]R37[文献标识码]B [文章编号]1671—8348(2017)28—3968～03外膜囊泡(out membrane vesicle,omv)为细菌在自然生长过程...
本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法,包括下述步骤:(1)将沙门氏菌菌液,进行10,000×g,4℃,15min离心;(2)回收上清,不要将菌液沉淀倒出,进行13,000×g,4℃,15min离心;(3)回收上清,用PVDF膜滤器进行过滤2次;(4)将过滤的上清进行40,000×g,4℃,2h;弃去上清。本发明应用的高速离心的方案...
该时期细菌总数最大,外膜囊泡分泌量最多,是提取外膜囊泡的最佳时间点.2.奇异变形杆菌外膜囊泡的分离提取奇异变形杆菌培养至16h后,采用超滤离心法和密度梯度离心法分离提取纯化外膜囊泡,运用透射电镜观察其外观形态,纳米颗粒跟踪分析仪测定密度和粒径,BCA蛋白定量分析试剂盒测定蛋白浓度,SDS-PAGE试验分析其蛋白组分....
本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法,包括下述步骤:(1)将沙门氏菌菌液,进行10,000×g,4℃,15min离心;(2)回收上清,不要将菌液沉淀倒出,进行13,000×g,4℃,15min离心;(3)回收上清,用PVDF膜滤器进行过滤2次;(4)将过滤的上清进行40,000×g,4℃,2h;弃去上清.本发明应用的高速离心的方案,...
目的基于超速离心改良法快速分离提取肺炎克雷伯菌分泌的外膜囊泡并进行鉴定和定量.方法将购于国家卫生健康委员会临床检验中心经典肺炎克雷伯菌(cKP)标准菌株和台湾大学馈赠高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)标准菌株分别置于M9基础培养基中培养9 h,利用超速离心改良法提取外膜囊泡(OMV),然后采用负染法于透射电子显微镜下观察...
【摘要】目的 对两种方法提取的铜绿假单胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的纯度、产量及外毒素A(ETA)含量进行比较.方法 分别采取超滤浓缩法和Optiprep密度梯度离心法提取PA的OMV,负染电镜检测形态及纯度;BCA法检测两种方法提取的OMV产量并用Western blotting对OMV中所含ETA进行比较;建立OMV感染人肺癌上皮细胞A549模型并检测...
对两种方法提取的铜绿假单胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的纯度,产量及外毒素A (ETA)含量进行比较.分别采取超滤浓缩法和Optiprep密度梯度离心法提取PA的OMV,负染电镜检测形态及纯度;BCA法检测两种方法提取的OMV产量并用Western blotting对OMV中所含ETA进行比较;建立OMV感染人肺癌上皮细胞A549模型并检测IL-8表达水平.超滤...
最近准备提取细菌外膜囊泡，超速离心提取。要用100KD超滤管先浓缩菌液，这样会影响提取OMVs提取的量吗？