提取尿液中的外泌体,WB 检测外泌体标志蛋白表达。 WB 检测结果显示产品提取的外泌体均可检测到外泌体的标志蛋白TSG101、CD81、CD9。 天然杀伤(NK)细胞外泌体 CD103阳性的肿瘤干细胞外泌体 骨关节炎中间充质干细胞MSCs分泌的外泌体 唾液外泌体GOLM1-NAA35 胰腺癌起始细胞外泌体 内质网应激促进肝癌细胞释放...
2、在TSG101指标检测中,上样量和CD9的一样,超离法和试剂盒法共6个孔都出现了条带,但是超离法的UC-1和UC-2条带亮度比较显著。 综合上述BCA数据和WB结果可知,虽然超离法得到的外泌体蛋白浓度较低,但是其纯度较高,基本就是真正的外泌体蛋白;而试剂...
有趣的是,四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)、热休克蛋白(HSP60、HSP70)和ESCRT相关组分(Alix和TSG101)已被确认存在于外泌体中,这为它们的识别和检测提供了一定的标记。 图2 外泌体的生物发生、内容物和内化作用。外泌体是由多囊泡体与质膜融合而衍生的囊泡。来自供...
外泌体中含有多种蛋白,如四次跨膜蛋白 CD9、TSG101、flotillin-1 等;外泌体也含有核酸如DNA、mRNA、微小RNA ( microRNA,miRNA) 、非编码RNA以及脂质。外泌体作为细胞间通讯的关键介质,可将信息传递至受体细胞,通过配体-受体方式与靶细胞相互作用,参与多种生物过程,如免疫调节、病毒感染或肿瘤微环境的改变。外...
(1)首先需要通过Western Blot(WB)来鉴定外泌体表面标志物是否存在于样品中。外泌体检测常用的标志蛋白有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70。 (2)利用电镜来分析外泌体的形态特征; (3)通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征(粒子浓度、直径分布等) ...
外泌体中含有多种蛋白,如四次跨膜蛋白 CD9、TSG101、flotillin-1 等;外泌体也含有核酸如DNA、mRNA、微小RNA ( microRNA,miRNA) 、非编码RNA以及脂质。外泌体作为细胞间通讯的关键介质,可将信息传递至受体细胞,通过配体-受体方式与靶细胞相互作用,参与多种生物过程,如免疫调节、病毒感染或肿瘤微环境的改变。外...
外泌体的鉴定 国际囊泡协会（MISEV2018）规定了外泌体鉴定的最小实验要求，包括1） 总体表征：至少3个阳性蛋白（至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白）和1个阴性蛋白标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81，以及溶质蛋白TSG101、Alix、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Caln...
外泌体蛋白组分丰富,可大致分为两种类型:一类是外泌体结构性蛋白质,多分布于外泌体表面或内腔,包括细胞骨架成分如微管蛋白、肌动蛋白和微丝结合蛋白等,膜融合和转运相关蛋白如Rab家族蛋白、Alix和TSG101等,跨膜蛋白如CD9、CD63和CD81等。另一类是相对特异的来源细胞蛋白质,抗原提呈细胞如巨噬细胞、DC细胞等来源...
外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9、CD63和CD81;细胞质蛋白,如肌动蛋白(Actin)和钙磷脂结合蛋白(Annexins);参与生物功能的分子,如凋亡转接基因2互作蛋白X(ALIX)、肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)、热休克蛋白(HSP70、HSP90),以及细胞分泌的特异性蛋白。其中CD9、CD63、HSP70、TSG101是外泌体常用的鉴定...