纳米颗粒跟踪分析技术(NTA):NTA利用光散射和布朗运动的特性获得液体悬浮液中的样本粒度分布的检测方法。检测中通过光学显微镜,可直接观察纳米颗粒,收集纳米颗粒的散射光信号,跟踪其布朗运动轨迹,对复杂样品具有极高的分辨率。该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快,检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。蛋白质印迹...
上述几种方法,方法一、二、三提取的纯度不够,方法四提取的量不够,我们可以将这两组方法综合起来,先用方法一、方法二、方法三粗略提取外泌体,再用方法四提纯外泌体。外泌体获取 外泌体鉴定 据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM...
研载生物科技(上海)有限公司采取超速离心(差速离心)分离得到外泌体,可处理细胞上清,血清、血浆、尿液、体液、植物,组织等不同类型样本,纯度高,得率大,满足于后续不同实验的需求。 三、外泌体鉴定方式 想获得高质量的外泌体并不容易,一是外泌体中可能混有杂质,二是...
粒径分析是从整体上对外泌体大小的分布情况进行检测,具有准确、快速、重复性好等优点,是对现有外泌体鉴定方法的良好补充。3、Western Blot检测 Western blot是通过抗原抗体特异性结合的原理,对外泌体标志蛋白进行检测,从蛋白质层面对外泌体进行鉴定。常用的外泌体标志蛋白包括CD63、TSG101及Alix等。图5 外泌体...
外泌体(exosomes)是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡,特指直径在40-100nm的盘状囊泡,其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。 外泌体形态鉴定-透射电子显微镜(TEM) 透射电镜把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而...
国际囊泡协会(MISEV2018)规定了外泌体鉴定的最小实验要求,包括1) 总体表征:至少3个阳性蛋白(至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白)和1个阴性蛋白标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,以及溶质蛋白TSG101、Alix、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Calnexin、细胞核蛋...
外泌体(Exosome):由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-150 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、脂质双分子层结构。
外泌体(exosomes)是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡,特指直径在40-100nm的盘状囊泡,其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。 外泌体形态鉴定-透射电子显微镜(TEM) 透射电镜把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而...
外泌体(exosomes)是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡,特指直径在40-100nm的盘状囊泡,其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。 01 外泌体形态鉴定 透射电子显微镜(TEM) 透射电镜把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞...
如何进行外泌体鉴定 WB验证:检测外泌体标志蛋白的表达情况 鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定外泌体的标志蛋白是否存在于样品中,外泌体形成于早期胞内体,在内吞体转运复合体(ESCRT)及一些相关蛋白的调控下,早期胞内体发生内出芽形成多个腔内小囊泡,构成多胞体(MVB),MVB 最后在GTPase家族中的RAB酶调解下与...