严紧型:质粒的复制受宿主DNA的严格控制,在宿主中拷贝较小,一般1~3个拷贝。 松弛型:质粒的复制受宿主DNA的控制比较松,在宿主中拷贝数多,一般10~200个拷贝。 因此,通常选用松弛型质粒作为基因工程的载体,以期获得高产量的重组质粒。当然,当克隆的基因产物对宿主有害时,需选用严紧型质粒,防止宿主因有害基因的大量表...
理想的基因克隆载体应具备: (1)在宿主细胞内可自行复制,并保持一定的拷贝数; (2)有适宜的限制性核酸内切酶切割位点,最好对同一种限制酶有单一切点; (3)载体分子应尽量小,可插入较大的外源DNA而不影响复制; (4)有一定的筛选标记,便于识别和筛选。 质粒可作为载体是由于其本身具有以下特点: (1)质粒是存在于...
解释质粒,为什么质粒可作为基因载体。 答案 答:质粒是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质。 质粒:(1)具有较小的分子量。经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克隆载体的分子大小最好不要超过10Kb。pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段; (2)具有两种抗菌素抗性基...
质粒，作为一种小型、圆形的DNA分子，广泛存在于细菌中。在细胞与基因治疗中，质粒主要用作载体，携带治疗性基因进入目标细胞。质粒的生产流程包括菌体扩增和下游纯化两个主要环节。菌体扩增：质粒生产的第一步 质粒的生产始于大肠杆菌的发酵扩增。通过优化培养条件，提高细菌的生长密度，可以显著增加质粒的产量。然而，...
1、基因克隆载体系统基因克隆载体系统质粒载体质粒载体噬菌体载体噬菌体载体柯斯质粒载体柯斯质粒载体单链噬菌体载体单链噬菌体载体噬菌粒载体噬菌粒载体染色体定位整合载体染色体定位整合载体人工染色体载体人工染色体载体其它特殊用途载体其它特殊用途载体目的基因克隆载体工具酶受体系统 单独的基因不易进入细胞 进入后不能维持...
:(1)具有较小的分子量.经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克隆载体的分子大小最好不要超过10Kb.pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段;(2)具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载...
目前所用的载体有细菌的质粒(如大肠杆菌质粒)、噬菌体或病毒,更多的是经过人工改造的一些载体.用于分子克隆的载体都应具备下述条件: ① 在细胞内能自主复制,即具有复制原点,可以使所携带的外源DNA在受体细胞内忠实地复制; ② 有适宜的限制酶切位点.最好是对多种限制酶有单一切点,且酶切位点不在复制原点内 ③...
质粒是一类分子实体，特指原核生物细胞内源性的可复制的小型环状 DNA。基因表达载体是一个抽象概念，...
01 进入细胞方式不一样 质粒通过转染进入目的细胞，病毒通过感染进入目的细胞，特异性更强，且效率更高。