四唑盐法是一种常用的定量测定金属离子浓度的方法,其基本原理是利用四唑盐与金属离子形成稳定的配合物,通过测量四唑盐与金属离子配合物的吸光度来计算金属离子的浓度。四唑盐法具有操作简便、灵敏度高、选择性好等优点,广泛应用于环境、生物、化学等领域。
四唑盐(MTT)比色法是一种常用于细胞活力检测的经典方法,其检测原理主要基于活细胞线粒体中的酶促反应。以下是该方法的详细原理:一、MTT的化学结构与活性 MTT,全名3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,是一种黄色的四唑盐。它本身是一个非极性分子,不能直接溶于水,但在不含酚红的培养液或...
四唑盐(MTT)比色法可应用于: (1)检测细胞存活和生长; (2)大规模的抗肿瘤药物筛选; (3)细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定; (4)生物活性因子的活性检测。 实验原理 活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中...
细胞活力是指细胞群体中活细胞 占总细胞的百分比。 四唑盐比色法是一种检测细胞活力的方法,四唑盐是一种能接受氢原子的显色剂,化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,简称为MTT。MTT在不含酚红的培养液或0.01 mol/LPBS中溶解后为黄色,活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT(黄色)...
四唑盐比色法的原理 活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。 无菌材料 生长液;胰蛋白酶(0.25%+EDTA,1mmol/L,溶于PBSA中);MTT: 3...
四唑盐(MTT)比色法检测细胞活力 一、实验目的 掌握MTT法检测细胞活力的方法。 二、实验原理 四甲基偶氮唑盐(MTT)为淡黄色粉末,水溶性好,易通过细胞膜而进入细胞。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶于水的紫色结晶物甲躜,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。一般情况下结晶物的生成量与活...
1. 每孔加入MTT溶液(5 mg/ml)20 ul,37℃孵箱中继续孵育4 h。 2. 终止培养,小心吸弃孔内培养上清液。 3. 对于悬浮生长的细胞,需离心(1000 rpm,5 min),然后弃去孔内培养液。 4. 每孔加入150 ul DMSO,振荡10 min,使结晶物充分溶解。 四、比色 ...
Leagene琥珀酸脱氢酶染色液(四唑盐法)以琥珀酸为底物,在酶作用下脱氢,硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体,接受氢后被还原为甲噁,呈蓝紫色,用以代表琥珀酸脱氢酶的活性。NBT孵育液含有特殊的中间递氢体,可使定位更加准确,染色更加清晰。组成: 编号 名称 DE0065 60ml Storage 试剂(A): NBT孵育液 50ml...
琥珀酸脱氢酶染色液(四唑盐法)以琥珀酸为底物,在酶作用下脱氢,硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体,接受氢后被还原为甲噁,呈蓝紫色,用以代表琥珀酸脱氢酶的活性,NBT孵育液含有特殊的中间递氢体,可使定位更加准确,染色更加清晰。 琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)是此琥珀酸氧化酶系的第一个酶,位于线粒体...
乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)主要由四氮唑蓝孵育液、阴性对照组成。染色后酶活性部位呈蓝紫色沉淀。乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)以乳酸为底物,在酶作用下脱氢,硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体,接受氢后被还原为甲噁,呈蓝紫色,用以代表H型乳酸脱氢酶(心型,即LDH1)的活性。LDH1孵育液中含有特殊的中间递...