四倍体补偿技术通过将四倍体胚胎与二倍体的胚胎干细胞聚合成一个新的胚胎,其中四倍体细胞只参与胚外组织(如胎盘等)的形成而不参与胚体(发育成子代个体)的形成,而胚体则完全来源
相比于体细胞核移植技术,四倍体补偿技术则可以有效提高克隆效率,成为生产转基因动物的有效的方法。目前,四倍体补偿技术在验证干细胞全能性、研究基因功能、研究胚胎发育机理以及动物克隆上都有非常广泛的应用。 4n胚胎的制作:一般采用电融合法制作4n胚胎,比如:电压为100 v/mm,脉冲宽度为50μs,脉冲次数为2次时,融合率...
围绕新一代模式小鼠的应用思考,四倍体补偿技术应运而生。具体操作是将四倍体(4n)胚胎与二倍体(2n)胚胎或胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells, ESC)聚合,并持续培养直至发育形成一个嵌合体。在这个发育过程中,四倍体(4n)胚胎与二倍体(2n)胚胎的发育是不同的,...
四倍体是指一个细胞或个体携带了四份染色体组。 建立四倍体补偿技术主要包括以下步骤: 1.确定四倍体显性基因:通过基因测序等方法,确定四倍体个体中存在的显性基因。 2.诱导突变:通过诱导突变的方法,使得四倍体显性基因失活或变得无功能。 3.外源基因插入:将外源基因插入到四倍体个体中,用以替代原有的显性基因。 4.优胜...
四倍体补偿技术 四倍体补偿技术 人或者动物都是二倍体,在胚胎发育到2-细胞阶段的时候,可用电融和的方法使两个细胞融合为一个细胞,这样就获得了四倍体胚胎,四倍体胚胎是不能正常发育的,但是可以形成胎盘,如果将一种多能干细胞注入四倍体囊胚,可以获得一个完整的动物个体,那证明移进去的干细胞是全能的干细胞。
将胚胎干细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚,其中四倍体细胞只参与胚外组织(如胎盘等)而不参与其胚体的形成,而胚体则完全来源于二倍体胚胎干细胞,其可发育成完整小鼠个体,此即为四倍体补偿技术[2]。目前,使用CRISPR/Cas9等基因编辑技术,人们可以在胚胎干细胞实现几乎任何目标基因位点的编辑,进行基因插入、基因敲除...
与此相比,四倍体补偿技术绕过了嵌合体小鼠阶段,可以直接获得基因修饰小鼠,大大地节约了成本、缩短了研究周期.同时该技术较易获得不同胚胎发育期的基因修饰胎儿,在胚胎致死基因功能研究,尤其是在杂合状态下即呈现致死效应的,此为唯一有效的研究该基因功能的方法.利用其可拯救胚外突变表型的特点,该技术也可用于控制胚胎...
直接获得基因修饰杂合子小鼠. 利用电融合技术和Piezoelectricmicroinjecfion显微注射技术建立了四倍体补偿技术,小鼠四倍体胚胎的获得率(电融合率)为(93.01±1.37)%,经体外培养囊胚形成率为(82.49±2.08)%.通过显微注射方法将2种129品系小鼠来源的Es细胞(CJ7和SCR012)注射到四倍体囊胚腔中,获得了完全ES细胞来源的小鼠,...
目的 介绍四倍体胚胎补偿法制备ES小鼠技术的操作环节,加快该技术的推广应用.方法 综合分析近几年来国内外在小鼠四倍体胚胎与ES细胞嵌合的研究成果,并结合我们自己的实验结果,分析影响ES小鼠制备的各种因素.结果 四倍体胚胎不能正常发育至妊娠期末,通过四倍体胚胎与胚胎干(ES)细胞的嵌合可以得到完全由ES细胞发育而来的小鼠...