即充分利用噬菌体显露表达的特点,并结合DNA克隆技术实现了从DNA随机编码的水平表达小分子和大分子的混合群体,而借助亲和筛选法可从庞大、复杂的群体中获得具有生物活性功能的目的分子,噬菌体表位随机序列多肤库的构建与应用是这其中发展最快且具实际应用开发前景的一项技术[2][171、月太库技术的提出肤库技术的形成基于...
目的:拟将噬菌粒pCOMB3改建为更为稳定,高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体.方法:对常用噬菌体抗体库呈现载体pCOMB3序列进行点矩阵作图分析(Dot-Plot分析),切除其中重复区,纠正其多代培养后自删除特性.原克隆位点63bp的填充序列增加到1435bp以便于酶切鉴定和电泳回收.结果:构建了命名为pTMB2的噬菌粒载体.结论...
噬菌体表面,利用外源蛋白或多肽与待筛选分子的 进行噬菌体展示技术操作的前提是获得相应 特异性亲和作用,通过吸附 洗脱 扩增的筛选富集 的展示文库,主要包括展示随机肽库和抗体库两大 过程,得到与待筛选分子特异性结合的外源蛋白或 类,其中噬菌体展示随机肽库是由随机排列的氨基 多肽。噬菌体展示技术不但可以将外源...
摘要 一种噬菌体展示随机肽库的构建方法,所述方法采用NNK编码方式,将编码随机肽库的两条链经退火、延伸补平、双酶切后,与经同样双酶切的5’去磷酸化载体连接,电转TG1感受态细胞。扩增菌液后进行库容和多样性检验。利用该肽库筛选获得的肽段序列,通过测序分析即可得到与药物特异性结合的外源蛋白或多肽。该技术广泛...
噬菌体展示随机环八肽库的构建∗ 叶长烂,周㊀霞,谢浩然,马金魁,张宏斌ә (南部战区总医院医学实验科,广东广州510010)㊀㊀摘㊀要:目的㊀构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库.方法㊀通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段.将编码基因...
Ⅰ、MagaininⅡ单抗的制备及抗(体基因的克隆和表达Ⅱ、随机噬菌体肽库的构建和初步筛选,单抗制备,贝伐单抗,雷珠单抗,曲妥珠单抗,阿达木单抗,西妥昔单抗,利妥昔单抗,贝伐珠单抗,雷珠单抗注射液 文档格式: .pdf 文档大小: 3.72M 文档页数: 135页 顶/踩数: ...
cqvip:目的 构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法 通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽...
目的:构建能用于抗原表位筛选的庚型肝炎病毒(HGV)全基因组 cDNA噬菌体随机展示肽库.方法:将DN aseⅠ部分消化的HGV全基因组cDNA随机片段,克隆到噬菌粒载体pCANTAB5X中,使HGV抗原以融合蛋白的形式随机展示于噬菌体表面,并用原 位杂交,限制性酶切及DNA测序等方法鉴定所建文库的随机性和完整性.结果:所建肽库的容量为...
一种噬菌体展示随机肽库的构建方法,所述方法采用NNK编码方式,将编码随机肽库的两条链经退火,延伸补平,双酶切后,与经同样双酶切的5'去磷酸化载体连接,电转TG1感受态细胞.扩增菌液后进行库容和多样性检验.利用该肽库筛选获得的肽段序列,通过测序分析即可得到与药物特异性结合的外源蛋白或多肽.该技术广泛应用于...
一种噬菌体展示随机肽库的构建方法,所述方法采用NNK编码方式,将编码随机肽库的两条链经退火,延伸补平,双酶切后,与经同样双酶切的5'去磷酸化载体连接,电转TG1感受态细胞. One kind of random peptide phage display library construction method, the method using NNK encoding, encoding the two strands ...