噬菌体展示技术,噬菌体展示技术(phage display technology)是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。
噬菌体展示技术(phage display techniques,PDT)是以改造的噬菌体为载体,把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质区,使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面,进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体,最终获得具有特异结合性质的多肽/蛋白质,并实现基因克隆化的一种重要的分子生物学技术。 噬菌体展示技术...
1990年,噬菌体展示技术的研究遍地开花:Mc Cafferty等利用该技术构建了库容为106的抗体库,发展了新兴的抗体制备技术;George发现,噬菌体不会因外源DNA片段的插入而影响本身的黏附、侵入、整合功能;Scott、Cwirla和Devlin 3个研究小组几乎同时报道了用丝状噬菌体fd或M13构建随机6肽库,噬菌体展示肽库自此被广泛应用于生物...
噬菌体展示技术(phage display technology)的本质是一种筛选技术。将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中,随着噬菌体的传代,外源蛋白会展现在噬菌体表面,形成噬菌体文库。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选,便可快速的得到与该蛋白具有高度亲和力的抗体。筛选出的抗体可以进一步用于生物学功能研究。
噬菌体展示技术的步骤：1. 构建噬菌体载体：选择适当的噬菌体，通常是M13型噬菌体或T7型噬菌体，并构建一个能够容纳外源蛋白质或多肽编码序列的噬菌体载体。这个载体通常包括启动子、选择标记和适当的调控元件。2. 插入外源蛋白质或多肽序列：将外源蛋白质或多肽的编码序列插入噬菌体载体中，通常通过限制性内切酶切割...
噬菌体展示技术,是指通过基因工程技术将外源多肽或蛋白对应的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,重组后的噬菌体基因组在宿主菌内使外源多肽或蛋白与外壳蛋白以融合蛋白的方式表达,并在噬菌体自组装过程将外源多肽或蛋白展示到噬菌体外壳上。被展示...
•噬菌体展示应用•淘选过程中常见问题及解决方案 2 什么是噬菌体表面展示技术 Smith在1985年首次证实外源DNA可以插入丝状噬菌体基因III中，并与pIII蛋白融合展示。噬菌体外表展示技术：是一种将外源多肽或蛋白质的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白的一个构造基因的适当位置上,外源基因将随着外壳蛋白的表达而表达,从而使...
1噬菌体展示技术的原理 噬菌体展示技术是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下,使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达,融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物...
目前,对于噬菌体展示技术的定义为:指的是将外源基因序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因中,使外源蛋白与噬菌体的外壳蛋白融合表达,并展示在子代噬菌体的表面的一类新兴技术。 图2 Smith发现噬菌体展示系统示意图 1990 年,Mccafferty 等利用噬菌体展示技术成功构建出了第...