噬菌体库筛选抗体的原理是基于将感兴趣的蛋白质或肽段的基因序列插入噬菌体的基因组中,特别是噬菌体外壳蛋白的基因。这使得这些蛋白质或肽段能在噬菌体表面展示。噬菌体随后可用于筛选出与特定靶标(如蛋白质、抗原或细胞)具有高亲和力的序列。通过这种方法,可以高效地识别和优化与特定靶标相互作用的分子,这对药物发...
答:噬菌体侵染敏感寄主细胞后,释放出子代噬菌体,通过琼脂再扩散到周边细胞中,继续侵染引起更多细胞裂解,从而在平板上形成一种个肉眼可见透亮无菌近圆形空斑,称为噬菌斑,它是噬菌体存在一种特性标志,由此检出噬菌体存在。 单层琼脂法 将批示菌液和经恰当稀释噬检液与单层培养基一起倾注平板。充分混匀并凝固后,置适...
简述噬菌体展示技术的基本原理。相关知识点: 试题来源: 解析 噬菌体展示技术将外源基因插入噬菌体衣壳蛋白基因中,使编码蛋白展示在噬菌体表面,通过亲和筛选、扩增富集获得目标蛋白,实现基因型与表型直接关联。 噬菌体展示技术的核心是将外源DNA片段插入噬菌体衣壳蛋白(如M13噬菌体的pⅢ或pⅧ)基因中。外源蛋白以融合...
④ 进入细菌细胞内的噬菌体遗传物质会接管细菌的代谢系统,利用细菌细胞内的各种物质和能量,如核苷酸、氨基酸、酶等,进行自身遗传物质的复制和蛋白质外壳的合成。细菌原本的正常代谢活动被打乱,就像一个原本有序运转的工厂被外来指令强行改变了生产流程。例如,噬菌体利用细菌细胞内的核糖体,按照自身遗传信息合成各种所需的...
常用的辅助噬菌体有VCSM13和M13K07等。 辅助噬菌体的工作原理为:当含有重组基因的噬菌粒转染至大肠杆菌后,再用辅助噬菌体进行超染,辅助噬菌体合成的pⅡ蛋白就会优先识别噬菌粒上的正常基因间隔区(IG region),启动滚环复制,产生ssDNA,这样所产生的子代噬菌体外壳蛋白所包装的ssDNA主要是来自含有重组基因组的噬菌粒的...
噬菌体体外包装原理 噬菌体体外包装是指将重组噬菌体 DNA 或科斯质粒(cosmid)在体外与噬菌体的头部、尾部等蛋白质外壳成分进行组装,形成具有感染活性噬菌体颗粒的过程。其原理涉及多个步骤和相关因素,具体如下:1. 噬菌体结构与组装元件。噬菌体由蛋白质外壳(头部、尾部等结构)和内部的遗传物质(DNA 或 RNA)...
答案: 噬菌体分离的基本原理如下: (1)噬菌体对宿主的高度专一性,利用敏感菌株—宿主去培养和发现它们; (2)根据噬菌体感染宿主并使它裂解,可在敏感菌株(即宿主)的琼脂平板上出现肉眼可见的噬菌斑,一个噬菌体可形成一个噬菌斑,因此可计数,并可从中挑出噬菌斑继续纯化。 解析:空 5、论述题(40分,每题5分) 1...
原理上,利用³²P标记DNA(DNA含磷,蛋白质不含),³⁵S标记蛋白质(蛋白质含硫,DNA不含)。实验步骤包括:培养标记噬菌体→感染细菌→搅拌离心→检测放射性。离心后,³²P主要出现在沉淀(细菌内),³⁵S在上清液,证明DNA进入细菌而蛋白质未进入。结论支持DNA作为遗传物质,因只有DNA能传递遗传信息指导子代...
溶原性噬菌体采用整合策略,其基因组通过位点特异性重组整合至宿主染色体形成原噬菌体。这种潜伏状态依赖cI阻遏蛋白维持,当宿主遭遇DNA损伤等压力时,SOS反应激活RecA蛋白酶切割阻遏蛋白,启动裂解周期。溶原性转换赋予宿主菌新特性,如白喉棒状杆菌产毒能力依赖β噬菌体携带的tox基因,这种基因水平转移现象提示工程噬菌体可作为...