三、哺乳动物稳定表达细胞株的筛选: 转染含有pac基因的质粒或者感染含有该基因的病毒后,即可筛选 稳定表达株。 1、细胞转染或感染48小时后,将细胞置于含有适当浓度嘌呤霉素 的新鲜培养基中培养,此为处理组。 注意:当细胞处于分裂活跃期时,抗生素作用最明显。细胞过于密集, ...
嘌呤霉素( Puromycin )筛选稳定细胞株的步骤及方法Puromycin 是来源于 Streptomyces alboniger 的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选能够表达 pac 基因(puror)的细胞。pac 基因表达嘌呤霉素 N-乙酰转移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase),如果该基因表达,就会对嘌呤霉素产生抗性,这一特性目前普遍应用于...
Puromycin 不仅能用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。Puromycin 的作用特点是快速作用于细胞,一般2 天内可以杀死 99%的不表达 pac 基因的细胞。本产品浓度为10mg/ml,已过滤除菌,可以直接用于细胞培养。 使用说明: 一、 推荐工作浓度: 推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml,但最佳工...
嘌呤霉素(Puromycin)筛选稳定细胞株的步骤及方法Puromycin是来源于Streptomycesalboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌吟霉素,常用于筛选能够表达pac基因(puror)的细胞。pac基因表达嘌吟霉素N-乙酰转移酶(PuromycinN-acetyl-tranferase),如果该基因表达,就会对嘌吟霉素产生抗性,这一特性目前普遍应用于筛选表达pac基因的...
嘌呤霉素筛选稳定转染细胞 （1）day 0：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，孵育过夜； （2...
霉素细胞puromycin筛选培养基pac 嘌呤霉素(Puromycin)筛选稳定细胞株的步骤及方法Puromycin是来源于Streptomycesalboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选能够表达pac基因(puror)的细胞。pac基因表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PuromycinN-acetyl-tranferase),如果该基因表达,就会对嘌呤霉素产生抗性,这一特性目...
Puromycin 不仅能用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。Puromycin 的作用特点是快速作用于细胞,一般2 天内可以杀死 99%的不表达 pac 基因的细胞。本产品浓度为10mg/ml,已过滤除菌,可以直接用于细胞培养。 使用说明: 一、 推荐工作浓度: 推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml,但最佳工...
Puromycin 不仅能用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。Puromycin 的作用特点是快速作用于细胞,一般2 天内可以杀死 99%的不表达 pac 基因的细胞。本产品浓度为10mg/ml,已过滤除菌,可以直接用于细胞培养。 使用说明: 一、 推荐工作浓度: 推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml,但最佳工...
嘌呤霉素的最佳作用时间一般在1-4天之间。 (6)最小的抗生素使用浓度就是指从抗生素筛选开始1-4天内杀死所用细胞的最低筛选浓度。 嘌呤霉素筛选稳定转染细胞 (1)day 0:24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板,孵育过夜; (2)制备筛选培养基:含有最佳筛选浓度嘌呤霉素(由杀灭曲线确定)的新鲜培养基; (3)...