目的:构建一系列细胞周期蛋白依赖激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)在哺乳动物细胞的表达载体,为研究CDK2的功能和修饰提供实验材料。方法:从食管癌细胞中提取总RNA,逆转录PCR扩增CDK2编码区,然后将PCR产物克隆到T载体;扩增后的CDK2片段分别亚克隆入pcDNA3、pcDNA4、pNTAP和pEGFP等4种哺乳动物表达载体;最后,将...
王雯雯,王欣(天津医科大学附属肿瘤医院,乳腺癌防治教育部重点实验室,天津市肿瘤防治重点实验室,天津300060)· 基础研究·摘要:目的构建黄色荧光蛋白Venus重组载体,并观察其在哺乳动物细胞中表达情况。方法将Venus克隆至限制性内切酶处理的pCDH -CM V-M CS—EFl · Puro载体上,转染293T细胞,荧光显微镜下观察结果。48 ...
本发明属于基因工程及基因治疗技术领域,具体涉及一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体,同时还涉及该附着体表达载体的构建方法和应用。本发明在启动子上游反向插入第一核基质结合区序列,启动子下游正向插入内含子序列,内含子序列下游正向插入第二核基质结合序列,并
一种人类及哺乳动物细胞表达载体、表达系统及其构建方法和应用专利信息由爱企查专利频道提供,一种人类及哺乳动物细胞表达载体、表达系统及其构建方法和应用说明:本发明涉及一种人类及哺乳动物细胞表达载体、表达系统及其构建方法和应用。本发明通过在启动子的上游...专
目的构建黄色荧光蛋白Venus重组载体,并观察其在哺乳动物细胞中表达情况.方法将Venus克隆至限制性内切酶处理的pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上,转染293T细胞,荧光显微镜下观察结果.48 h后收集细胞蛋白,应用Western blot技术印证荧光蛋白Venus表达情况.结果重组载体经限制性内切酶鉴定及测序比对正确,转染293T细胞后可见明亮荧光...
目的:本课题拟构建hTERT基因哺乳动物表达载体pCI-neo-hTERT,并观察其在人类白血病细胞系K562中的表达,为进一步探讨hTERT在骨肿瘤方面的应用提供实验基础。方法:一、重组质粒的构建及鉴定从人骨肉瘤细胞系HOS中提取总RNA,并逆转录成cDNA;对逆转录获得cDNA行PCR以获得目的片段,电泳位置合适后切胶回收以纯化基因。将目的...
$诺思兰德(BJ430047)$建立了基因载体构建、工程菌构建、微生物表达、哺乳动物细胞表达、生物制剂生产工艺及其规模化生产技术以及滴眼剂药物开发等核心技术平台,为持续开发项目提供了保障。 公司坚持以临床需求为导向,依托自主核心技 术平台,主要致力于心血管疾病、代谢性疾病、罕见病和眼科疾病等领域生物工程新药的研发和...
(1)干扰素是动物体内合成的一种糖蛋白,可以用于治疗病毒感染和癌症,建立乳腺生物反应器大量生产干扰素,需借助基因工程的方法,常以哺乳动物的___为受体细胞。 为了保证干扰素基因只在乳腺细胞内表达,构建表达载体时必须在目的基因的前端加入___。 基因工程中往往不以原核细胞为受体细胞生产干扰素是由于有活性的干扰素需...
作为最常见的转染载体,质粒DNA含有重组基因和调控元件,可以转染到细胞中,用于基因表达调控,研究基因的功能、基因产物的突变分析和生化表征以及基因表达对细胞健康和生命周期的影响。对哺乳动物细胞转染来说,除了合适的载体,转染方法和转染试剂对转染的成功率也起到决定性作用。
目的构建尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒6b型晚期基因(HPV6b L1)的双顺反子表达载体,并使其在哺乳动物细胞内表达,以期建立含有HPV6b L1的细胞模型.方法表达质粒pEGFP-HPV6bL1经双酶切纯化后与经过相同双酶切的真核表达质粒pIRES2-EGFP连接,酶切鉴定,挑选阳性克隆进行测序.重组质粒pIRES2-HPV6bL1-EGFP转染进小鼠成纤...