7.嘿,机械破碎法可够直接的呀,像是用“大力金刚拳”把细胞打破来获取周质空间蛋白。就好像对待某些坚韧的微生物,它可是行之有效的哦! 8.哟呵,高压匀浆法厉害吧,就仿佛给细胞来一场“超强风暴”,催出周质空间蛋白。试试就知道对一些样本多有效啦! 9.总之,这么多方法各有各的奇妙之处,都能把周质空间蛋白给弄...
进行低压匀浆处理,之后除掉细胞碎片等杂质即得到含有目的蛋白的周质提取液;由此获得的周质提取液调pH值后进行高温加热处理,去除絮状沉淀后得到大肠杆菌周质空间Fab蛋白粗纯化液.本发明提取方法在尽量保证Fab提取收量的基础上有效地去除了Fab相关杂质,将目的蛋白中Fab纯度提高至90%以上,从而降低后续蛋白质层析纯化的难度...
36.实施例1本技术提供了一种大肠杆菌细胞周质蛋白的提取方法,采用如下的技术方案:一种大肠杆菌细胞周质蛋白的提取方法,具体包括以下步骤:s1、配制处理液,按含量规格50ml:1g,将大肠杆菌加入到处理液中,于30℃的温度下,静置处理40min,然后置于离心机中,在4000rpm下离心10min,弃去上清液,收集剩余菌体,得预处理菌体;s2...
所述的提取方法包括:将周质空间表达Fab蛋白的重组大肠杆菌菌体混悬于含有二价阳离盐的酸性缓冲液中,进行低压匀浆处理,之后除掉细胞碎片等杂质即得到含有目的蛋白的周质提取液;由此获得的周质提取液调pH值后进行高温加热处理,去除絮状沉淀后得到大肠杆菌周质空间Fab蛋白粗纯化液。本发明提取方法在尽量保证Fab提取收量的...
将菌体与tris、edta溶液混匀后室温条件进行搅拌,上清即为周质空间fab蛋白提取液。此方法操作过程简单,便于后期大规模放大,但是提取过程中搅拌时间较长(至少12h),容易导致菌体破裂,得到的提取液过于粘稠,影响后期分离纯化。且此方法对周质蛋白的提取效率有待进一步研究。文献us6967241b2描述了一种从大肠杆菌中提取异源...
1.一种大肠杆菌周质空间蛋白提取液的制备方法,其特征在于,包括步骤: (i)混匀步骤,将周质空间分泌表达目的蛋白的重组大肠杆菌菌体混匀于酸性溶液中,获得菌体混悬液; (ii)匀浆步骤,对步骤(i)中的菌体混悬液进行N次匀浆处理,获得匀浆液,其中N为≥1的正整数,优选N为1-15,更优选N为2-10,最优选N为3-5; (...
1.一种大肠杆菌周质空间蛋白提取液的制备方法,其特征在于,包括步骤: (i)混匀步骤,将周质空间分泌表达目的蛋白的重组大肠杆菌菌体混匀于酸性溶液中,获得菌体混悬液; (ii)匀浆步骤,对步骤(i)中的菌体混悬液进行N次匀浆处理,获得匀浆液,其中N为≥1的正整数,优选N为1-15,更优选N为2-10,最优选N为3-5; (...
所述的提取方法包括:将周质空间表达Fab蛋白的重组大肠杆菌菌体混悬于含有二价阳离盐的酸性缓冲液中,进行低压匀浆处理,之后除掉细胞碎片等杂质即得到含有目的蛋白的周质提取液;由此获得的周质提取液调pH值后进行高温加热处理,去除絮状沉淀后得到大肠杆菌周质空间Fab蛋白粗纯化液。本发明提取方法在尽量保证Fab提取收量的...
所述的提取方法包括:将周质空间表达Fab蛋白的重组大肠杆菌菌体混悬于含有二价阳离盐的酸性缓冲液中,进行低压匀浆处理,之后除掉细胞碎片等杂质即得到含有目的蛋白的周质提取液;由此获得的周质提取液调pH值后进行高温加热处理,去除絮状沉淀后得到大肠杆菌周质空间Fab蛋白粗纯化液。本发明提取方法在尽量保证Fab提取收量的...