双荧光素酶报告基因实验是检测这类转录因子和其靶基因启动子中的特异顺式元件结合的重要手段。 将启动子区域插入双荧光素酶报告基因载体,同时在实验细胞中共转过表达对应的转录因子,可分析转录因子过表达是否提高或降低荧光素酶活性。 图8 我司验证特定转录因子与启动子互作时的载体构建原理图。图片来源:伯远生物科研...
荧光素酶报告基因检测的原理是通过检测荧光素酶的活性来反映基因表达的情况,将荧光素酶基因与目的基因或其调控元件(如启动子、增强子、3’UTR等)连接在一起,构建成报告基因载体,转染或转化到目标细胞或生物中。当目的基因或其调控元件受到内外因素的影响而发生表达变化时,相应地也会影响荧光素酶基因...
双荧光素酶报告基因实验:常见问题与误区解析 | 在分子生物学研究中,双荧光素酶报告基因实验因其高灵敏度和准确性而被广泛应用于启动子活性分析、转录因子功能研究等领域。然而,实验过程中你可能会遇到各种问题和误区。今天,我们就来一一解析这些常见问题,助你实验顺利!1. 转染效率低,复孔重复性差问题:转染效率低,...
双荧光素酶报告基因介绍 学生:刘艳玲 导师:陈小平研究员 日期: 双荧光素酶报告基因实验介绍 简介 双荧光素酶报告基因实验是常用的 检测 miRNA 与靶基因结合、转录调 控和启动子活性的实验。 荧光素酶是生物体内催化荧光素或 脂肪醛氧化发光的一类酶的总称, 来自于自然界能够发光的生物,例. 纺纱学. 2 绪论 基本...
双荧光素酶报告基因实验 * 技术原理荧光素底物在荧光素酶作用下会发光,且光强度能反应荧光素酶的蛋白表达量。而荧光素酶的蛋白表达量,又和启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率等有关。利用这个特点,将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表达,再检测其发光强度,就能判断这些序列对蛋白表达的影响。这就叫...