利用正交翻译系统向遗传密码中添加非规范氨基酸来产生非天然蛋白质是最有效的方法,这依赖于正交的氨酰-tRNA合成酶/tRNA对。正交翻译系统最常用的是来自嗜热菌的吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶。它有很好的稳定性,不容易被改造得没活性,但是它的比活性较低。近期,来自加拿大曼尼托巴大学的Nediljko Budisa另辟蹊径,用一个...
(2006.01)C07K 14/435 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01) (54)发明名称吡咯赖氨酸氨酰-tRNA合成酶突变体及其筛选系统和应用(57)摘要为解决现有技术中无法在特定位点特异性引入带有乳酰化基团的蛋白的问题,本发明提供一种吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶突变体和一种筛选前述吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶突变体的系统...
本发明涉及缺少核定位信号和/或包含核输出信号的古细菌吡咯赖氨酰tRNA合成酶.本发明还涉及编码所述吡咯赖氨酰tRNA合成酶的多核苷酸,包含所述多核苷酸以及通过吡咯赖氨酰tRNA合成酶酰化的tRNA或编码这样的tRNA的多核苷酸的真核细胞,利用所述细胞制备包含非天然氨基酸残基的多肽的方法,以及可用于所述方法的试剂盒.E·...
为解决现有技术中无法在特定位点特异性引入带有乳酰化基团的蛋白的问题,本发明提供一种吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体和一种筛选前述吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体的系统和方法.基于基因密码子扩展技术,通过建立一种正交的双报告基因筛选系统,筛选到吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体,可用于将乳酰化赖氨酸定点引入...
为解决现有技术中无法在特定位点特异性引入带有乳酰化基团的蛋白的问题,本发明提供一种吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体和一种筛选前述吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体的系统和方法.基于基因密码子扩展技术,通过建立一种正交的双报告基因筛选系统,筛选到吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶突变体,可用于将乳酰化赖氨酸定点引入大肠...
5.为解决现有技术中存在的上述技术问题,本发明基于基因密码子扩展技术,通过建立一种正交的双报告基因筛选系统,筛选到吡咯赖氨酸氨酰-trna合成酶突变体,可用于将乳酰化赖氨酸定点引入大肠杆菌、哺乳细胞等目标宿主中,实现含乳酰化赖氨酸修饰的组蛋白以及非组蛋白的表达及应用(翻译后修饰及生理、病理过程),扩展了该正交...