叶盘法的具体做法是:先将实验材料的叶子表面进行消毒,再用消毒过的打孔器从叶子上取下圆形小片,即叶盘。将它放在土壤农杆菌培养液中浸泡4～5min,然后用滤纸吸干,放在特殊培养基上培养两天后,转移到含有适当抗生素的选择培养基上继续培...
遗传转化-叶盘法 预培养:选取5叶期本氏烟生长较肥厚的叶片,用无菌水冲洗数遍后,用70 %乙醇表面消毒1min,25%的次氯酸钠消毒2-3min,再用无菌水冲洗数遍,无菌滤纸吸干表面水分,再用手术刀切成1cm2小块,置于含有6-BA(2 mg/L)的MS培养基上进行预培养2-3d。 共培养:菌体用100ml MS+200μl AS(100μg/ml...
将叶盘倒入农杆菌重悬液中侵染 8~10 min,其间不断摇晃使得叶盘充分接触农杆菌。侵染结束后,用滤纸吸干叶盘表面水分,移入共培养基中,叶盘正面朝下接触共培养基。将培养皿用锡箔纸包好放入25℃烟草培养室中暗培养3 d。 (4)继代培养(见视频):取出暗培养后的叶片,先用无菌水清洗表面菌体,然后分别用含有1000 ...
叶盘法的基本原理是利用植物的组织再生能力,通过培养植物的叶片组织培养而成的小体,在适当的培养基组合下,通过添加适当的物质和条件,将目标基因组转化至植物细胞中。 叶盘法的实验流程一般可以分为以下几个步骤: 1.植物材料的准备:从健康的烟草植株中采集叶片,并将其洗净,并进行无菌处理以确保实验的纯度。 2.建立...
叶盘法遗传转化的原理是利用植物叶片的再生能力和自愈能力,通过外源基因的导入和整合,使其在植物细胞中表达。具体步骤如下: 1. 取一片健康的植物叶片,并进行消毒处理,以杀灭表面的微生物。 2. 将消毒后的叶片切成小块,并将其培养在含有适当营养物质的培养基中。 3. 在培养基中添加适量的激素和外源基因载体。
叶盘法转基因烟草技术 实验目的: 学习并了解叶盘法转基因烟草的技术流程。 二. 实验原理: 土壤中的农杆菌是一种革兰氏阴性菌,能够感染植物的受伤部位。农杆菌中有一种环形的 Ti 质粒,Ti 质粒最重要的两个区域为 T-DNA 区和毒性区,T-DNA 是 Ti 质粒上唯一能够整合到植物染色体上的序列,而毒性区上一系列则...
2 实验设计 烟 目的基因 在大肠杆菌中 含有目的基 草 酶切、连接 转化、筛选,扩增 因的T-DNA 叶 片 给体质粒 T-DNA 给体质粒 待 转 转化 化 叶 农杆菌 盘 含有目的基因质粒 和Ti辅助质粒的 农杆菌 叶盘法转化 获得转基因 鉴定 筛选 植物后的 分化 后续工作 具有目的基因表型 转化植株 组织培养 基因...
题主是否想询问“油菜叶盘法怎么转化”？准备油菜种子，准备叶盘，转化叶盘。1、准备油菜种子：选择健康的油菜种子，并确保它们是同一品种。2、准备叶盘：从油菜植株上选择健康的叶片，切成适当大小的叶盘。3、转化叶盘：将叶盘放入含有外源基因的溶液中，进行转化。
植物细胞利用Ti 转化常用的方法为叶盘法。叶盘法是一种简单易行的植物细胞转化、选择与再生的方法。具体做法是: 先将实验材料(如烟草)的叶子表面进行消毒，再用消毒过的不锈钢打孔器从叶子上取下圆形小片，即叶盘。为了对叶盘进行接种处理，需将它放在土壤农癌杆菌培养液中浸泡4~ 5min,然后用滤纸吸干，放在看护...