实验原理 4Firefly luciferase和Renilla luciferase之所以被称为报告基因,是因为在基因表达调控研究时,利用两者表达产生的荧光比值可以监控、证实微观层面上的分子间的相互作用。具体做法是:将靶基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在Firefly luciferase基因的上游,或把3’-UTR区或lncRNA结合序列克隆在Firefly luciferase基因...
双荧光素酶报告（Dual-Luciferase Reporter）实验是一种常用的遗传调控元件研究手段，通过构建包含荧光素酶基因的报告质粒，如将感兴趣的基因调控元件插入萤火虫荧光素酶（firefly luciferase）上游，以及加入海肾荧光素酶（Rinilla luciferase）作为对照，来评估基因表达变化。这项技术起源于1990年，经过30年的...
双荧光素酶报告基因实验介绍Dual-luciferase reporter gene assay introduction 萤火虫和海肾荧光素酶都具有快捷、 简便、 灵敏度高的检测特点, 被公认为是理想的报告基因, 因为它们具有完全不同的进化起源、酶学结构和底物要求。 萤光素酶报告基因的测定需要用光度计或多功能微孔板检测仪, 且发光强度与荧光素酶的数量...
图1:萤火虫和海肾萤光素酶检测原理图 Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit是一种辉光型双萤光素酶报告基因检测试剂盒,具有高灵敏度和发光信号稳定的特点。本试剂盒中含有高纯度的萤火虫萤光素和腔肠素,在同一个样品中先以萤火虫萤光素为底物检测萤火虫萤光素酶,后淬灭萤火虫萤光素酶的萤光信号,并同时以腔...
碧云天生产的Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒(Dual-Lumi™ Luciferase Reporter Gene Assay Kit,Dual-Lumi™ Luciferase Assay Kit),简称Dual-Lumi,是一种无需洗涤或收集细胞的用化学发光法先后直接测定细胞内萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)和海肾萤光素酶(sea pansy (Renilla reniformis) luciferase...
1.Dual-Luciferase Reporter assay system was used to detect the transcription activity of constructed promoter.方法通过PCR和定点突变技术,构建了含CCNH基因基础启动子及-1G突变启动子,用双荧光素酶报告系统观察此SNP对CCNH基因启动子转录活性的影响。 2)dual-lueiferase cis-reporting system双荧光素酶顺式报告系...
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1.These DNA fragments were inserted into the pGL3-Basic which was the vector of luciferase reporter gene.方法提取人内皮细胞基因组DNA,设计引物克隆EOLA1基因上游不同长度的基因片段,插入到含荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中,经限制性内切酶酶切鉴定、测序。 2.[Method] Clonging the promoters of CYP3A...
Luciferase的上游, 或把3'-UTR 区克隆在Luciferase的下游, 构建成报告基因(Reporter gene)质粒,然后转染细胞,用 适当药物等处理细胞后裂解细胞, 通过检测萤光素酶活性的 高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。 海肾萤 光素酶更多地被用作检测转染效率的内参, 以消除细胞数量 和转染效率的差异。 萤火虫萤...
Dual -Luciferase Reporter Assay Kit首先以荧光素为底物检测萤火虫荧光素酶报告基因的活性,之后在淬灭该荧光的同时,以腔肠素为底物检测海肾荧光素酶报告基因的活性,具有检测迅速、灵敏度高、检测范围广、无细胞内源活性干扰等特点。 储存条件 未打开包装前避光储存于-20℃,打开包装后根据产品说明书上的单个组...