pmirGLO是由普洛麦格(Promega)开发的,目前常用的一种商品化双荧光素酶报告载体。pmirGLO是设计用于定量分析miRNA活动的双荧光素酶报告载体,将萤火虫荧光素酶基因(luc2)和海肾荧光素酶基因(hRluc-neo)构建在一个载体上。萤火虫荧光素酶基因的3’端有一个多重...
1、验证microRNA同mRNA靶向互作：将待测mRNA的3’UTR序列插入报告基因载体，再共转入该microRNA，如果荧光素酶活性下降，则提示为其靶序列。2、验证microRNA同lncRNA靶向互作：将候选的lncRNA序列插入报告基因载体中F-Luc 3’UTR区域，检测萤光素活性。3、启动子结构分析：将启动子区域序列（通常2k左右）进行分段截...
荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。 双荧光素酶报告基因检测系统(Dual-Luciferase®)可以同时检测萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,F-Luc)和海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,R-Luc)的活性,先以荧光素(luciferin)为...
实验目的: 本实验采用双荧光素酶(Dual-Luciferase)报告系统,探究基 因调控机制。通过构建表达报告基因的质粒,研究不同因素对基 因转录的影响。 实验材料: 1. 双荧光素酶检测试剂盒(Promega) 2. 293T 细胞系 3. Lipofectamine 2000 转染试剂 4. 培养基(DMEM + 10% FBS) 实验步骤: 1. 构建表达报告基因的质...
海肾荧光素酶（Renilla luciferase或R-Luc）以腔肠素（coelenterazine）为底物，在氧分子存在的条件下催化...
双荧光素酶报告基因检测系统采用萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)和海肾荧光素酶(Rellina Luciferase)组成双荧光素酶报告基因实验系统(Dual-Luciferase Reporter Assay),可以较好地体现检测结果的精确性。实验中萤火虫荧光素酶与基因表达的特定实验条件相关,海肾荧光素酶用来做转染的内参,以校正不同样品之间转染的转染...
氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)、β-gal、荧光素酶基因(Luc) 报告基因的应用: 探讨启动子作用,细胞信号转导,基因转录调节,作为分子标记,生物大分子间的相互作用,RNA干扰研究,影像技术,药物筛选等 在如今发展起来的众多报告基因中,荧光素酶报告基因以检测快速、灵敏度高、线性范围广,且在大多数哺乳动物细胞无内源性表达...