双元载体是一种由两种质粒组成的植物遗传转化系统,通过农杆菌介导将外源基因精准整合到植物基因组中。其核心结构包括微生物边界和T-DNA边界,
在之前的文章“ 说说那些隐秘往事…”中,我们详细介绍了农杆菌及常用的载体系统,今天伯小远想再和大家一起来学习一下双元载体,主要想讲讲目前最常用的双元载体、载体各元件对转化的影响,最后再分享一个基因功…
双元载体系统是由两个分别含有T-DNA和Vir区的相容性突变Ti质粒构成的双质粒系统,因T-DNA与Vir基因位于不同质粒并通过反式激活实现T-DNA转移,故称反式载体。 1. **核心构成**:包含两个相容性突变Ti质粒 - 原则性分离:一个质粒携带T-DNA序列(转移至植物基因组的片段),另一个携带Vir区(编码激活T-DNA转移...
(2)双元载体的构建流程 步骤1:目标基因克隆 将目标基因插入T-DNA区的多克隆位点(MCS),通常使用限制性内切核酸酶确保基因方向与表达框架正确(如置于强启动子CaMV 35S下游)。 步骤2:载体组装 将T-DNA区、细菌...
质粒类型:植物双元表达载体 克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶 载体大小:12361 bp 载体抗性:Kanamycin (卡那霉素) 稳定性: 含有pVS1复制子,确保在农杆菌中的高稳定性。 小尺寸: 载体大小约为12361 bp,便于操作和转化。 限制性内切酶克隆: 设计有多个限制性内切酶位点,方便进行模块化质粒改造和DNA片段的插入。
双元载体名词解释双元载体名词解释: 一种质粒携带有转化所需要的Vir基因;另一个质粒携带有两个T一DNA的边界重复序列,待转移的外源基因被克隆在两个边界重复序列之间,两者共同构成通常所指的双元载体。©2022 Baidu |由 百度智能云 提供计算服务 | 使用百度前必读 | 文库协议 | 网站地图 | 百度营销 ...
论文中各种双元载体出现的频率,原本伯小远是想用关键词与Ftracker数据库中的信息进行比对,然而数据库虽然包含了1350万+篇文章,但是只有题目和摘要的信息,并没有全文的信息,想了半天,那就只能使用Google学术搜索出的关键词条数来进行频率计算了,所以这个结果只能参考一下喔,实际并不能反映真正论文中各种双元载体出现...
首先，将外源基因插入带有筛选标记的载体，然后将带有GFP或Gus的片段切除，将其插入到双元载体的LB（左边界）和RB（右边界）之间，插入方向是灵活的。构建过程涉及将带有35S promoter-expression gene-gfp的双元载体转化至农杆菌，然后通过农杆菌的ti-DNA转移机制，将LB和RB之间的片段整合到植物的基因组中...
T-DNA双元载体:植物基因神器 植物基因工程中,T-DNA双元载体系统可是个明星。这个系统通常包含两个关键的质粒,它们各自有着独特的任务。首先,让我们来聊聊第一个质粒——这个质粒通常来自野生宿主,带有复制起始点(ori),能让质粒在各种细菌中生长,包括大肠杆菌和农杆菌。这个质粒上通常会携带:...