不对称PCR是一种通过调整引物浓度比例来选择性扩增单链DNA(ssDNA)的方法,常用于制备单链DNA探针(如杂交探针、测序模板等)。通过优化引物比例和反应条件,不对称PCR可高效制备单链DNA探针,适用于大多数分子生物学实验需求。 1.不对称PCR制备单链DNA探针...
磁珠分离法在单链 DNA 制备中有所应用。基因克隆是获取单链 DNA 的途径之一。化学合成法能够精确制备特定序列的单链 DNA 。噬菌体展示技术可用于分离单链 DNA 。限制性内切酶处理后再分离能得到单链 DNA 。亲和层析在单链 DNA 制备中发挥作用。离子交换色谱有助于分离出单链 DNA 。 单链DNA 还可通过滚环扩增...
制备单链 DNA 模板 许多应用都要求使用单链 DNA 模板。通过固定双链 PCR 产物来制备两个单链 DNA 片段可能是Dynabeads M-280 链霉亲和素磁珠应用较广泛的方案。首先对两个 PCR 引物之一进行生物素化,生成 PCR 产物。将 PCR 产物固定到磁珠上,以分离生物素化和非生物...
- A. 对称PCR:使用等量引物,主要扩增双链DNA,不符合要求。- B. 反向PCR:用于扩增已知序列侧翼的未知DNA,不涉及单链制备。- C. RT-PCR:以RNA为模板合成cDNA,产物为双链DNA。- D. 不对称PCR:使用过量的一侧引物,后期只扩增单链DNA,正确。- E. 嵌套PCR:用于提高特异性,仍扩增双链DNA。第二个问题中,温度...
—Nicking酶法，此试剂盒能高效制备出高纯度且序列正确的长单链DNA（ssDNA，长度为1,500 base或3,000 base）。Long ssDNA Preparation Kit的独特之处在于其简便的操作流程和出色的纯化效果，确保用户能够轻松获得所需的高纯度长单链DNA。突破长单链DNA制备的界限，我们的试剂盒能高效制备长达10 kb的单链DNA。
DNA (从鲑鱼精巢制备的DNA III型钠盐 Sigma #D1626) l×TE缓冲液 pH 8.0 缓冲液平衡酚 1: 1 (W)酚 氯仿 氯仿3 mol L 乙酸钠 pH 5.2 100%乙醇 冰冷超声波发生器 步骤 1) 将DNA溶于pH 8.0的1×TE缓冲液,终浓度为10 mg/mL,于4℃搅拌过夜。 因每一次转化需要用200 载体DNA,制备大量的载体DNA Gnig...
除了上述传统方法外,还有一些创新的长单链DNA制备方法被不断研究和开发。例如,有研究者开发了一种将双链DNA扩增后再分离成单链的方法——甲醇相应聚合物PCR(MeRPy-PCR)。这种方法通过引物修饰、PCR扩增、甲醇选择性沉淀和特异性切割等步骤,高效地制备出高纯度的长单链DNA。 综上所述,长单链DNA的制备方法多种多...
1、本公开提供了一种长单链dna及其制备方法和应用,以至少解决现有技术中存在的以上技术问题。 2、根据本公开的第一方面,提供了一种长单链dna的制备方法,包括以下步骤: 3、s1:固定ssdna1; 4、s2:提供连接有polyc序列的ucnp(稀土上转换纳米颗粒);将带有pc键的ssdna2与所述连接有polyc序列的ucnp混合,使所述pc...
Lambda制备单链DNA的方法是一种实验技术,旨在通过特定的生物化学过程获得单链状态的DNA分子。本文将详细介绍一种基于Lambda噬菌体DNA的制备单链DNA的方法。 一、实验原理 Lambda噬菌体是一种双链DNA病毒,其基因组大小适中,生物安全性高,被广泛应用于分子生物学实验。通过特定的酶处理,可以使Lambda噬菌体DNA解链,形成...
本发明涉及一种单链DNA制备方法,包括如下步骤:(1)准备具有粘性末端的双链DNA序列和茎环引物,所述茎环引物包括成环部分和非成环部分,所述非成环部分含有与所述粘性末端互补的互补序列,利用所述互补序列与双链DNA序列的所述粘性末端互补连接;(2)使用具有双链外切酶活性的DNA外切酶对步骤(1)获得的长茎环引物从5...