近日,来自美国约翰霍普金斯大学医学院的Joshua W. Modell实验室在Cell发表题为A natural single-guide RNA repurposes Cas9 to autoregulate CRISPR-Cas expression的论文。文章对细菌中CRISPR-Cas系统表达的自我调控机制进行了研究,发现细菌中天然存在...
堪称“基因魔剪”的CRISPR/Cas9基因编辑技术在育种中有重要作用。CRISPR/Cas9系统转录出的具有序列特异性的单向导RNA(sgRNA)能引导Cas9蛋白靶向结合目的基因的特定序列并对其切割,如图A所示。断开双链的目的基因在修复过程中会发生碱基的插入、缺失或替换,从而实现对目的基因的编辑。水稻的OsSWEET11基因(位于11号染色体...
向导rna可以是双向导rna,包括crisprrna(crrna)、反式激活crrna(tracrrna)、crrna和tracrrna(crrna和tracrrna的复合物);或单向导rna(sgrna)。在一个例子中,用于碱基编辑的组合物可以包括核糖核蛋白(rnp),所述核糖核蛋白包括编码脱氨酶和经修饰的rna导向的核酸酶的mrna、和向导rna,或者包括脱氨酶和经修饰的rna导...
本研究表明,短至 9nt 的截短向导 RNA 能够有效实现 CRISPRi 在多个基因组位点的靶向,这是 dCas9 的独特属性,因为具有催化活性的 Cas9 无法在短于 17nt 的向导 RNA 作用下进行靶向切割。单个截短向导 RNA 可将 CRISPRi 导向数百个 TF 结合位点,有望靶向功能性调控元件。通过构建包含 24 个 10nt 向导的...
1CRISPR/Cas9基因编辑技术可通过设计sgRNA(单链向导RNA)序列,引导与其结合的Cas9(一种核酸酶)对特定基因位点进行切割。胞嘧啶碱基编辑器是该基因编辑技术的一种衍生技术,可精确实现胞嘧啶的定点突变。其方法是将胞嘧啶脱氨酶与Cas9相连接,在sgRNA与目标基因的特定序列结合后,胞嘧啶脱氨酶可将目标基因特定位置上的胞...
这些新试剂包括用于CRISPRi的首个已上市合成单向导RNA,以及具有mRNA和慢病毒形式的dCas9-SALL1-SDS3阻遏物(相应专利正在申请中)。借助这些新技术,研究人员将能够灵活地在任何时间段、从单个基因读数到高通量研究的任何规模下,在几乎所有的细胞系内进行基因抑制。
1近年诞生的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑,其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割,下列叙述正确的是 a链Cas9蛋白日标DNA识别序列向导RNA二目标DNA A. Cas9蛋白由相应基因指导,在核糖体和高尔基体中合成 B. 向导RNA的识别序列和目标DNA之间通过T和A,G...
2、逆转录是在逆转录酶的作用下,以RNA为模板合成DNA的过程. 解答解:A、Cas9蛋白在核糖体中合成需要消耗能量,A正确; B、向导RNA中的双链区碱基对间遵循碱基配对原则,碱基配对方式为A-U、C-G,B正确; C、向导RNA可通过转录形成,该过程需要RNA聚合酶催化,不需要逆转录酶,C错误; ...
近年来,单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing, scRNA-seq )技术发展迅速,可用于研究肾脏、尿液以及血液等不同来源细胞群体中单个细胞的基因表达模式。将scRNA-seq应用于肾小球疾病有助于生成全面的肾脏细胞图谱,从细胞层面解析肾小球疾病的复杂机制,...
CRISPR/Cas9基因编辑技术是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行准确切割的技术(如图),下列相关叙述的正确是( ) A. Cas9蛋白通过破坏氢键实现对特定基因的准确切割 B. 向导RNA与DNA结合的双链区遵循碱基配对方式为A-T,C-G C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成 D. 通过设计向导RNA中...