在我们的细胞学实验中,往往会遇到需要在一群细胞中挑选出特定类型的细胞克隆单独培养扩增的情况。比如,我们在筛选抗药性细胞时,在一段时间药物诱导后,有一部分细胞对药物产生抗性,获得耐药性存活下来,但是活下来的细胞中,耐药性有强有弱,为了得到背景更一致的耐药株,我们需要将细胞单克隆化,比较筛选出满足要求的细胞;比如,通过慢病毒将外源基因整
下面我们介绍一些单克隆细胞筛选和获得方法:• 有限稀释法:这是一种传统的单克隆筛选方法。首先,将细胞悬液稀释到每毫升几个或几十个细胞的程度,然后将稀释后的细胞分配到96孔板或384孔板中。理论上,如果稀释得足够,每个孔中只有一个细胞。然后,将孔板放入细胞培养箱中进行培养,每个孔中的细胞会逐渐生长和...
病情分析:病情诊断:单克隆细胞在医学检查中通常与某些血液系统疾病相关,特别是与单克隆B淋巴细胞增殖性疾病如慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤等有一定联系。但仅凭“单克隆细胞”这一描述,无法直接确诊具体疾病,需结合其他临床信息、实验室检查结果及影像学检查综合判断。 病因分析:单克隆细胞的出现往往意味着体内某一...
根据下游应用的不同,单克隆细胞株可以分为两类:用于研究的研究型单克隆细胞株以及用于蛋白/抗体大量生产的生产型高表达单克隆细胞株。 研究型单克隆细胞株筛选 研究型稳定细胞株通常利用G418系统进行阳性克隆筛选,neo基因为非扩增基因,它対基因的拷贝数没有影响,利用G418对细胞池进行筛选可得到稳定转染的阳性克隆,对得到...
一、材料:单克隆细胞 二、试剂: 1.秋水仙素:称取秋水仙素 1 mg溶于 10 mL生理盐水,即配成100 μg/mL,过滤后用0.5mL EP管分装备用,1 mL培养物中加入4μL或 8μL,使最终浓度为 0.4 μg/mL或 0.8 μg/mL。【因秋水仙素具有一定的毒性和致癌作用,故配制使用时做好防护措施,配置后一定要避光保存,...
试题来源: 解析 克隆(clone)为细胞通过无性繁殖形成的细胞系,起源于同一个杂交瘤细胞的细胞系称单克隆。单克隆细胞系的细胞称为单克隆细胞。单克隆抗体为单克隆细胞分泌的抗体,是一种分子结构、氨基酸排列顺序以及特异性等方面高度一致的蛋白质。反馈 收藏 ...
实验室常用的单克隆细胞株挑选方式有三种:一、有限稀释法,采用梯度稀释原则,将细胞悬液连续倍数稀释至极低密度,接种于96孔板,直至孔中出现单个细胞克隆。简单易操作,但整个培养过程比较耗时。具体步骤如下:l单细胞悬液制备:取对数生长期的细胞,用胰酶消化,制成单细胞悬液;l细胞计数:取少量细胞悬液,用台...
细胞单克隆源性通常指所有细胞都来自同一母细胞,具有相同的遗传信息和表型特征。在细胞生物学和生物工程领域,细胞单克隆性是非常重要的,因为它确保了实验结果的一致性和可重复性。 在实验室中,通过单克隆培养技术或其他方法,可以获得单克隆性细胞系,这些细胞系可以用...
单克隆细胞系是指由单个细胞分裂而来的一群具有相同遗传特征的细胞。它们在生物医学研究中扮演着重要的角色,例如药物筛选、疾病模型建立和细胞生物学研究等。然而,构建单克隆细胞系并非易事,需要经过严格的筛选和鉴定过程。二、传统细胞筛选方法的局限性 传统的细胞筛选方法主要依赖于细胞的形态学特征和生长特性。这种...