技术路线: 将淋巴细胞(B细胞)和骨髓瘤细胞经过PEG融合,得到融合细胞,然后通过HAT培养基的筛选得杂交瘤细胞,再将杂交瘤细胞单克隆化得到不同的杂交瘤细胞克隆,再通过ELISA法筛选到能产生所需抗体的阳性克隆,最后工业化生产或免疫小鼠得到单克隆抗体。反馈 收藏 ...
[分析]单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
单克隆抗体的制备: (1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 (2)获得杂交瘤细胞: ①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合; ②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 (3)克隆化培养和抗体检测。 (4)...
研究人员拟以某病毒抗原蛋白A来制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。相关叙述正确的是() A. 利用PCR技术扩增基因A,需加入模板、引物、dNTP
(3)单克隆抗体筛选中,将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交,其目的是若某种抗体可以与病毒外壳蛋白结合,则产生该抗体的细胞为所需的杂交瘤细胞,从而把所需的杂交瘤细胞筛选出来。 (4)DNA连接酶能连接DNA片段,脱氧核苷酸的磷酸基团位于5'端,-OH位于3'端,①②③脱氧核苷酸链的两端基团有误;DNA连接酶能催化合成磷酸二酯...
在制备McAb的过程中,许多环节 需要加饲养细胞,如在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养过程中,加入饲养细胞是十分必要的。常用的饲养细胞有:小鼠腹腔巨噬细胞(较为常用)、小鼠脾脏细胞或胸腺细胞。也有人用小鼠成纤维细胞系3T3经放射线照射后作为饲养细胞。饲养细胞的量为一般为2×104或105细胞/孔。
将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内,可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单克隆抗体,并构建抗体药物偶联物(ADC),其主要技术路线如图所示。(1) 步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射和。 (2) 步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是。 (3) 吸取③中的上清液到④的培养孔中,根据抗原—抗体杂交原理,需加入进行专...
某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。下列叙述正确的是( ) A. 用蛋白A
某病毒对动物养殖业的危害十分严重。我国学者以该病毒外壳蛋白A为抗原制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是( ) A. 与小鼠骨髓