对于低通量的细菌转化,单管包装的化学感受态细胞可以直接进行热激,可避免因反复冻融造成的转化效率降低。对于中通量的细菌转化,可选择预装入联管中的感受态细胞,再借助多通道移液器进行转化。对于高通量细菌转化,选择预装入96孔板的感受态细胞,可实现模块化孵育,甚至可兼容自动化。 ▲图3. 适用于低、中、高通量细菌...
化学感受态细胞转化的第三步,加入LB培养基,37 ℃复苏,该步骤的主要作用是使感受态细胞恢复生长,使感受态细胞中的质粒表达抗性基因,这样在涂板后带有目标质粒的大肠杆菌在相应抗性的平板上才能正常生长。 综上,化学感受态细胞在转化过程中进行冰上放置是为了使DNA吸附到感受态细胞表面;热激步骤使感受态细胞表面形成孔洞,D...
将质粒DNA转化入细菌的过程称为转化，通常有化学转化法和电穿孔法两种方法。电穿孔法转化率更高，适用于构建cDNA文库等重要场合，而化学转化法则适用于常规克隆实验。化学转化法中用到的感受态细胞是通过冰预冷的CaCl2处理细菌制备得到的。化学感受态细胞转化实验步骤可以简单分为四步：冰上融化感受态细胞、将...
DH5α 化学感受态细胞——转化 1)取感受态细胞置于冰浴中融化,待完全化冻后轻轻混匀。如需分装,可将融化的细胞悬液转移到无菌、预冷的离心管中,置于冰浴中备用。混匀、分装时动作应轻缓,以防细胞破裂。 2)向50~100微升细胞中加入目的DNA,轻轻混匀,冰浴中放置30min。注意:加入的体积以不超过感受态细胞体积的...
TOP10化学转化感受态细胞瑞楚生物REBIO 英文名称:TOP10 Chemically Competent Cell 尺寸:袋装,包邮包干冰 特性:pUC19检测转化效率>108 cfu/μg DNA 灭菌情况:灭菌 储存条件:干冰运输,-80℃保存6个月 货号产品规格销售价折扣价库存数量操作 R09004-30T30×100μl¥350.00¥350.0010 ...
(当平板只含有转化质粒上的抗生素时,28℃培养48 h即可;平板中同时含有转化质粒上的抗生素和20μg/ml rif 时,需28℃培养60 h;如果使用的平板含有50μg/ml rif 则需要28℃培养72-90 h)。 3 注意事项: 3.1. 感受态细胞最好在冰上融化。 3.2. 混入质粒时应轻柔操作。 3.3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终...
EHA105(pSoup) 化学转化感受态细胞瑞楚生物REBIO 英文名称: EHA105(pSoup) Chemically Competent Cell 尺寸: 袋装,包邮包干冰 特性: 经pCAMBIA2301 (11.6 Kb)质粒检测转化效率可达104 cfu/μg 灭菌情况: 灭菌 储存条件: 干冰运输,-80℃保存6个月 货号 产品规格 销售价 折扣价 库存 数量 操作 R09408-20...
本品是在大肠杆菌 BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。可同时表达T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等质粒的蛋白表达。适合于非病毒蛋白重组表达。使用pUC19检测转化效率达107cfu/μg DNA 以上。
DH5α化学转化感受态细胞瑞楚生物REBIO 英文名称: DH5α Chemically Competent Cell 尺寸: 袋装,包邮包干冰 特性: pUC19检测转化效率>108 cfu/μg DNA 灭菌情况: 灭菌 储存条件: 干冰运输,-80℃保存6个月 货号 产品规格 销售价 折扣价 库存 数量 操作 R09001-30T 30×100μl ¥350.00 ¥350.00 ...
本品是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。适合于非病毒蛋白重组表达。使用pUC19检测转化效率达107cfu/μg DNA以上。