在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体,在不发生突变的情况下,具有完全相同的遗传性状,常称无性繁殖(细胞)系;其动词(clone,cloned,cloning)含义指在生物体外用重组技术将特定基因插入载体分子中,即分子克隆技术。研究基因的第一步是分离它并获得许多与它完全相同的...
分子克隆技术是一种在分子水平上操作的技术,用于将特定的DNA片段从供体生物中分离出来,然后通过体外重组、转化和转导等方法,将其插入到适合的克隆载体中,并将重组克隆载体引入到合适的寄主体内进行复制与扩增。最终通过筛选、分离出所需的目的克隆载体,得到多拷贝的目的DNA,从而实现目的基因的扩增。二、涉及研究领...
分子克隆技术 分子克隆(molecularcloning)又称为基因克隆、基因工程、DNA克隆、重组DNA技术 克隆(Clone)指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆指按照人的意愿,在体外将某种生物的DNA片断插入到载体 (质粒、病毒等)中,形成遗传物质的新组合---重组DNA分子(重组子),然后将重组子转移到...
分子克隆技术简单地可以理解为将DNA片段(或基因)与载体共价连接,然后引入寄主细胞,再筛选获得重组的克隆。分子克隆方法的第一步是获得所需的插入物(目的基因),目的基因可以是来自真核、原核生物的任何细胞类型的DNA或mRNA,也可以是实验室直接合成的。通过PCR、酶切等技术将基因组DNA或cDNA(通过mRNA体外逆转录...
作为一种生物信息学技术,分子克隆技术基本上利用质粒或载体把被学习的DNA片段提取出来,通过该质粒或载体可携带DNA片段,并用作接种细菌的载体,解析基因组的形态结构及功能。 分子克隆技术的发展历史自20世纪70年代的DNA克隆的研究开始,经过几十年的发展,它在许多领域都取得了巨大的成就,如医学、生物工程、食品处理等。
分子克隆技术中最常用的是Ⅱ型酶,切割后得到的是带粘性末端或平末端的线性DNA。粘性末端,即限制性内切酶在DNA双链上交错切割,形成的核苷酸顺序互补的,可形成氢键的末端(见图2)。平齐末端,限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样形式的断裂是形成具有平末端的DNA片断(见图3)。图2 EcoR I切割DNA...
分子克隆技术课程主要是针对生物技术专业、生物科学专业、生命科学与技术基地班本科生及生物学类专业研究生而开设的实验课。实验内容涉及分子克隆的一些基本方法及基本操作技巧,主要包括分子克隆和分子杂交两大部分: 分子克隆技术:DNA重组技术是分子生物学的核心内容。本实验利用质粒载体克隆外源DNA片段,通过这个实验大家可以...
分子克隆技术 分子克隆(molecularcloning) 又称为基因克隆、基因工程、DNA克隆、重组DNA技术 克隆(Clone) 指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。 分子克隆 指按照人的意愿,在体外将某种生物的DNA片断插入到载体 (质粒、病毒等)中,形成遗传物质的新组合---重组DNA分子 (重组子),然后将重组子转移...
分子克隆技术(质粒DNA和DNA插入片段的制备、连接反应以及重组质 克隆(Clone)是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆(Molecular Cloning)是指由一个祖先分子复制生成的和祖先分子完全相同的分子群,发生在基因水平上的分子克隆称基因克隆(DNA克隆)。其基本原理是:将编码某一多肽或蛋白质的基因(...