以下是凝胶电泳的一般步骤: 1. 准备凝胶:根据需要分离的目标分子大小选择合适的凝胶,常用的有琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。按照产品说明书的要求溶解凝胶粉末,并加入缓冲液,进行融化和固化。 2. 准备样品:根据实验目的,将需要分离的DNA、RNA或蛋白质样品进行处理。例如,可以通过酶切DNA,或者将蛋白质样品进行还原和...
百度试题 结果1 题目凝胶电泳的一般操作步骤。相关知识点: 试题来源: 解析 答: 制胶,加入电泳缓冲液,加样,电泳,剥胶,染色,脱色。反馈 收藏
若使用溴化乙锭染色,需在电泳结束后将凝胶浸入0.5μg/ml染色液震荡20分钟,再转入纯水脱色15分钟。紫外观察时曝光时间控制在5秒以内,长时间紫外线照射会引起DNA断裂。当出现条带拖尾现象时,可能原因包括样品降解、点样孔损坏或电场不均匀,需排查加热模块温度是否过高、缓冲液是否重复使用超过三次。 特殊样本处理方案 对...
目录 收起 1.准备琼脂糖凝胶 制胶 加样 电泳 注意事项 安全操作 1.准备琼脂糖凝胶 根据需要分离的DNA片段大小,选择合适的琼脂糖浓度(通常0.7%至1.5%)。(一般来说,0.3% 琼脂糖凝胶适合分离较大的DNA片段,范围在5-60 kb。0.6% 琼脂糖凝胶适合范围在1-20 kb。0.7% 琼脂糖凝胶适合范围在0.8-10 kb。
(1)配制凝胶的缓冲液和电泳缓冲液不是同时配制的。 (2)电泳时电压过高。可以在电泳前15分钟用较低电压(3 V/cm),等条带出孔后,再调电压。 (3)慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压。 3.条带弥散 (1)DNA发生降解。 (2)电泳缓冲液陈旧(根据DNA Maker对照,观察是否为电泳体系的问题)。
琼脂糖凝胶电泳是一种常用的DNA分离技术,以下是详细的实验步骤:1️⃣ 准备电泳缓冲液:配制足够的电泳缓冲液(1×TAE或0.5×TBE),用于灌满电泳槽和配制凝胶。2️⃣ 清洗制胶模具:用蒸馏水彻底清洗制胶模具和梳子,然后放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子。3️⃣ 配制凝胶:根据需要分离的DNA片段大小,...
在进行凝胶电泳之前,首先需要制备样品。样品制备是决定凝胶电泳结果质量的关键步骤之一。常见的样品制备方法包括DNA提取、RNA提取、蛋白质提取等。 1. DNA提取 DNA提取是从细胞或组织中获得DNA样本的过程。常见方法包括酚-氯仿法、盐法等。通过这些方法可以将DNA从细胞中纯化出来,并得到高质量和高浓度的DNA样本。 2....
(1)制备琼脂糖凝胶：检查凝胶模具是否完好，选择加样孔径大小适宜的梳板，垂直架在 模具的一端，使梳板底部离模具水平面的距离为1.0mm左右。按照被分离的DNA分子的大小决 定凝胶中琼脂糖的百分含量。(2)称取一定量的琼脂糖，溶解在×1 TAE电泳缓冲液中，置微波炉中加热至琼脂糖溶化均匀(如果配制浓度为1%的...
A：主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再作后续实验。Q：“皱眉”(两边向下中间鼓起)形带原因?A：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。Q：为什么带出现拖尾现象?A：主要...
2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般 20~30 ml); 3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料,轻轻旋转以充分混匀凝胶溶液,倒入电泳槽中,待其凝固; ...