e. 流式图的横坐标是 FL1-H (FITC-H) 代表 Annexin V-iFluor 488 的荧光强度。Annexin V-iFluor 488 用于检测早期凋亡细胞。流式图纵坐标是 SSC-H (SSC-H) 代表侧向散射光强度，用于检测细胞的颗粒性和细胞内结构的复杂性，侧向散射光强度通常与细胞内颗粒物的大小和数量有关。f. 低侧向散射 (SSC-H) ...
华韵-科研干货｜细胞凋亡流式图怎么看？1分钟详解！huayunbio #HUAYUN华韵生物# 科研干货|细胞凋亡流式图怎么看？1分钟详解！今天分享的是【细胞凋亡流式图】～主要从以下几个方面展开✅基础概念✅细胞凋亡流式图怎么看？✅相关疑问与解答广州华韵生物科技有限公司 ...
Annexin V和PI双染组：同样进行55℃水浴处理或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，之后分别加入5μl Annexin V和5μl PI。实验组：直接加入5μl Annexin V和5μl PI，室温下避光孵育10~15分钟，再加入400μl Binding Buffer，置于流式管中，半小时内进行检测。上机检测步骤：绘制两个散点图：图1的横坐标为FSC，纵...
检测方法:常用Annexin V/PI双染色法。Annexin V能与外翻的磷脂酰丝氨酸高亲和力结合,而PI无法透过完整的细胞膜(PI是一种核酸染料,在细胞膜完整的情况下,无法进入细胞染核),因此早期凋亡细胞仅被Annexin V染色,而PI阴性。 2)晚期凋亡(晚凋) DNA降解:DNA被降解为约180~200bp的片段,这是晚凋的一个显著标志。 细...
一、流式细胞术检测细胞凋亡 1、线粒体膜电位检测 检测原理:正常细胞线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体基质中,形成聚合物, 488nm激发时的最大发射波长为590nm,可以产生红色荧光,在流式上表现为FL1和FL2双阳性; 发生早期凋亡的细胞线粒体膜电位的降低, JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体, 48...
通过使用荧光标记的Annexin V（如Annexin V-FITC）与PI的联合染色，可以在流式细胞仪上同时检测PS的外翻和细胞膜的完整性，从而区分活细胞、早期凋亡细胞、中晚期凋亡细胞和坏死细胞。1.材料 肿瘤细胞系、FALCON 管、EP管、吸头、移液器和400目滤网，胰酶、1XPBS、凋亡试剂盒 2.实验步骤 ①具体分组：对照组（未...
将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体,在微定量板上吸附组蛋白体,加上清液使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合,加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合,加酶的底物,测光吸收制。4、流式细胞仪定量分析(目前较...
Annexin V和PI双染法研究细胞凋亡是经典的流式实验之一,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)在正常细胞中存在细胞膜内侧,在细胞凋亡早期磷脂酰丝氨酸从细胞膜内侧外翻到细胞膜表面,与Annexin V-FITC结合。而PI是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在细胞凋亡发生中晚期,由于细胞膜通透性增加,PI透过细胞膜从而...
图2. 流式细胞术显示 C666-1 和 HK-1 细胞中 MUC-16 的缺失诱导了细胞凋亡[4]。 a. 活细胞中,不可检测到 Annexin V-FITC/PI 的荧光。因为活细胞的细胞膜完整,不结合 Annexin V-FITC,PI 也无法穿过细胞膜进入细胞,不发光。 b. 早期凋亡细胞中,可以检测到 Annexin V-FITC 的荧光,但不可检测到 PI ...
一、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法,它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的(如下图3)。 图3:凋亡早期 PS从细胞膜的内侧外翻 ...