直接用柱状图表示Caspase活性可信度不高,建议结合流式分析结果图;或在使用了其他检测方法的情况下(如Annexin V-/PI流式凋亡分析、线粒体膜电位流式分析),可简化为简单的柱状图分析。 3、TUNEL染色 检测原理:TdT介导的dUTP缺口末端标记技术,荧光素( fluorescein )标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶( TdT Enzyme )...
检测方法:常用Annexin V/PI双染色法。Annexin V能与外翻的磷脂酰丝氨酸高亲和力结合,而PI无法透过完整的细胞膜(PI是一种核酸染料,在细胞膜完整的情况下,无法进入细胞染核),因此早期凋亡细胞仅被Annexin V染色,而PI阴性。 2)晚期凋亡(晚凋) DNA降解:DNA被降解为约180~200bp的片段,这是晚凋的一个显著标志。 细...
许多种类的癌基因表达以后,阻断了肿瘤细胞的凋亡过程,使肿瘤细胞数目增加。因此,通过细胞凋亡角度和机制来设计对肿瘤的治疗方法就是重建肿瘤细胞的凋亡信号传递系统,抑制肿瘤细胞的生存基因的表达,激活死亡基因的表达。从细胞凋亡角度看,肿瘤的发生是由于凋亡受阻所致 四、基于流式细胞术的凋亡检测手段 PS(磷脂酰丝氨酸)...
通过使用荧光标记的Annexin V（如Annexin V-FITC）与PI的联合染色，可以在流式细胞仪上同时检测PS的外翻和细胞膜的完整性，从而区分活细胞、早期凋亡细胞、中晚期凋亡细胞和坏死细胞。1.材料 肿瘤细胞系、FALCON 管、EP管、吸头、移液器和400目滤网，胰酶、1XPBS、凋亡试剂盒 2.实验步骤 ①具体分组：对照组（未...
一、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法,它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的(如下图3)。 图3:凋亡早期 PS从细胞膜的内侧外翻 ...
细胞生物学 知识 校园学习 生物 实验 科学 医学生 生物化学 细胞凋亡 医学实验 流式细胞术花花喜欢大爆炸 发消息 医学英语学习系统解剖学双语视频不断前进的语言民工不愈之殇 食贫道 实验技术 (4/4) 自动连播 995播放 简介 订阅合集 【实验技术】PCR 11:14 【实验技术】Western Blot 06:32 【实验技术...
从凋亡的早期、中期到晚期,在流式上都有相应的方法可用枟检测。 1、早期凋亡: 线粒体膜电位 JC-1是一种广泛使用的线粒体膜电位检测阳离子染料,它可进入带负电荷的线粒体内聚积形成聚集体,并488nm荧光激发,发出以红光为主的光谱,故在FL1/FL2散点图...
在流式细胞术检测细胞凋亡的实验中,结果通常被分为四个象限,每个象限代表不同类型的细胞状态。以下是这四个象限的具体解释:1️⃣ 左上象限:这个区域的细胞被PI染色,但未被Annexin V-FITC染色。这意味着这些细胞的细胞膜已经受损,但尚未发生PS外翻,可能是机械损伤的细胞或细胞碎片。2️⃣ 左下象限:这个区域...
下面将介绍凋亡流式检测的具体步骤。 一、细胞样本的准备 1. 收集需要检测的细胞样本,可以是细胞培养物或组织样本。 2. 用无菌PBS缓冲液洗涤细胞样本,去除培养基或组织液中的杂质。 3. 用离心机将细胞沉淀下来,去除上清液。 二、细胞的染色 1. 用无菌PBS缓冲液重新悬浮细胞,使细胞浓度达到合适的浓度。 2. 加入...
检测：将染色后的细胞上流式细胞仪进行检测，通过分析细胞的DNA含量分布来构建细胞周期图谱。二、流式细胞术检测细胞凋亡 细胞凋亡是细胞程序性死亡的过程，其检测通常依赖于细胞表面磷脂酰丝氨酸（PS）的暴露和细胞膜的完整性变化。在早期凋亡阶段，PS会从细胞膜的内侧翻转到外侧，而细胞膜仍然保持完整。此时，可以使用...