冰冻切片染色步骤冰冻切片染色的步骤如下: 冰冻切片染色的步骤如下: 1.配制染色液和分化液。根据所需的染色效果,配制染色液和分化液。例如,伊红染色液的配方是在95%乙醇100ml中加入1g伊红,玻璃棒搅拌均匀;1%盐酸酒精分化液的配方是36%-38%的盐酸1ml加入75%乙醇99ml中混匀。 2.将切片放入苏木精染液中染色一定...
显微镜下观察,细胞核蓝色,细胞浆为红色说明操作无误。 (6)染色完的片子需要做透明处理来延长保存时间。利用不同浓度的酒精(从低浓度—高浓度)和二甲苯进行该项操作。显微镜下观察,细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈现出深浅不一的红色。 (7)中...
在组织和包埋剂冷冻到发白后即可开始切片; 切片时右手摇轮转要力道均匀、柔和、缓慢,切片厚度掌握在5微米,左手持毛笔在切片形成时按住组织边缘,使其不发生卷曲 将切片展平粘贴在干净的载玻片上,应立即放入固定液中固定,如果固定不及时,会发生细胞退变,切片中细胞...
本文将介绍冰冻切片免疫组化染色的步骤和注意事项。 步骤一:样本制备 1.收集组织样本,根据需要进行切割和处理。 2.快速冷冻组织样本,可用液氮或乙醚等方法冷冻,并保存在低温环境中。 步骤二:切片制备 3.取出冷冻样本,将其置于切片机或切片冷冻器中。 4.进行组织切片,通常厚度为5-10微米,利用切片刀或者切片冷冻器...
冰冻切片免疫荧光染色步骤 : (1)冰冻切片取出,室温放置使其干燥后,用冷丙酮于4℃固定10分钟。 (2)切片用0.01MPBS清洗后加入1.2%双氧水作用30分钟,以除去非特异染色。 (3)0.01M PBS清洗,3次×10分钟。 (4)0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA的0.01M PBS,pH7.4)稀释至工作浓度的...
2 染色流程 固定冷冻切片组织 立即将粘附冷冻切片组织载玻片放入固定液中固定30s-1min。 注意事项:为获得最佳染色效果,应使用赛诺特提供的的冰冻组织固定液,其他品牌固定剂在使用前需经科室病理技师验证其有效性。 固定后清洗 切片固定后,将载玻片取出,放入自来水中轻轻晃动,完全除去载玻片上的固定液及OCT包埋剂。
冰冻切片的免疫组化染色步骤 1.准备工作: (1)准备正常组织冰冻切片,使用离心切片机将原有组织材料切成5-10μm厚的片层,切片后立即放入凝胶剂(如冰冻液中的季铵盐)内,紧急冷冻到-20℃; (2)准备石蜡糊,将石蜡熔解并加入一定量的溶剂使其至流体状态; (3)准备免疫染色的药品,比如羊抗体、抗原标记物(Biotin...
冰冻切片免疫荧光染色流程 一、准备液体和器材: 1. 表面活性剂:TBS-T,Triton X-100,PBS,Ethanol,DMSO; 2. 染色液:PBS,Trizma-HCL,和4%PFA; 3.小刀:刀片用于切片,可以用来将切片切割为更小的片段; 4.水槽:若可用多个水室,可以将液体装入不同的水室,流程操作更便捷; 5.酶标仪:一般是用来进行荧光染色的,...
4.将梢放入冰冻机的切割室,将刀头拉扯,然后上下拉动,从而完成组织的切割。 5.完成切割后,将切片放入保存液中,放入冰箱冷藏,保存至HE染色时使用。 三、组织贴片 1.将预先制备好的培养基,及HE染料容器加入离心机,离心至合适的转速。 2.将冷藏好的切片取出,用湿润的布蘸取适量的贴片剂,在切片表面覆盖贴片剂。 3...
冰冻切片HE染色步骤 1.组织包埋,使用OCT 首先,需要用铝箔纸制作一个模子。在模子里放入一些OCT,然后将96孔板放在液氮上。接着,将放有OCT的模子放在96孔板上,以防止铝箔纸模接触到液氮。等待OCT凝固后,取出模子,将修剪好的组织放在凝固的OCT上,再用OCT将组织包埋起来。不要包埋太多,然后将其放回液氮中,等待OCT...