原理: T-DNA是农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植物。除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中,基因由于发生碱基的插入或缺失而发生突变。
农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中。 农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒已成为植物分子生物学中广泛应用的遗传转化载体。T-DNA是Ti质粒上的片断,包含三个重要的...
体外实验中,VirD2不能将单链DNA连接到模拟靶序列,但可以介导T-DNA切割反应的逆反应,表明VirD2不具有通用的连接活性。 植物提取物可以以ATP依赖的方式将T-DNA连入模拟靶序列,表明T-DNA整合取决于植物连接酶。但是,进入植物细胞的T链可能没有直接连接到植物基因组的断裂上。相反,T链可以被宿主DNA聚合酶复制,并且可...
Ti质粒有两个重要区域:T-DNA区(是质粒上能够转移整合入植物受体基因组)和35kb的Vir区(毒性基因...
农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答。(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用___处理DNA以防止DNA片段的自身环化,需用___“缝合”双链DNA片段的平末端。 (2)目的基因是指编码蛋白质...
B、将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法,即用Ca2+处理微生物细胞使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,因此过程③常用Ca2+处理使农杆菌成为感受态细胞,B正确; C、过程④用酶解法去除植物细胞的细胞壁,即用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁,C错误; D、过程⑤⑥需要采用植物组织培养技术,其原理是...
农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答:T-DNA目的基因②E-IMAOT改造OT运载体农杆菌Ti质粒共培养愈伤试管苗植物细胞原生质体组织(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用___处理DNA以防止DNA...
(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用多种限制酶处理,原因是___,需用___(填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)“缝合”双链DNA片段的平末端。 (2)目的基因是指___和一些具调控作用的因子。由过程②形成的基因...
【题目】农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答: (1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用___处理DNA以防止DNA片段的自身环化,需用___“缝合”双链DNA片段的平末端。 (2)目的基因是指编...