农杆菌介导法是植物基因转化的最为普遍的方法,它的基本步骤包括()。①将有切口的叶片小块浸入农杆菌菌液中②利用重组Ti质粒转化农杆菌③向改造后的Ti质粒中插入外源目的基因④对天然Ti质粒进行改造⑤将被农杆菌侵染的叶片在培养基上培养请排出正确顺序 A. ①③④②⑤ B. ④③②①⑤ C. ①④②③⑤ D. ②...
农杆菌介导的遗传转化分为植物表达载体的构建、转化体系的建立、目的基因的转化、转化体的筛选与获得、转基因植株的分子检测与转基因植株的获得等步骤,它利用了农杆菌浸染植物细胞,将其植物载体携带的目的基因转移到植物染色体基因组中去,使再生的转基因植株带有目的基因表达的性状。 转化方法通常使用叶盘法,包括的步骤...
方法:组织培养、农杆菌介导法(遗传转化)。 实验步骤:(1)构建载体,转入筛选好的农杆菌,同时做农杆菌敏感试验;(2)遗传转化:外植体预培养,农杆菌侵染,共培养,筛选培养,分化培养,生根培养,移栽;(3)鉴定及基因功能表达的观察等。 可能出现的问题:(1)转化频率低,周期太长;(2)基因沉默,没有表达;(3)功能表达很低...
求农杆菌介导法植物基因转化的原理和步骤一、原理利用根瘤农杆菌Ti质粒(含T-DNA)介导将外源目的基因导入受体细胞的转基因方法称为农杆菌介导的基因转化。农杆菌可以感染受伤的植物细胞,通过基因转化把T-DNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上。这些外源基因在植物细胞中得到表达。二、操作步骤1.农杆菌...
农杆菌介导转化方法通常包括以下几个步骤: 1. 农杆菌培养:首先需要将含有目标基因的农杆菌培养至适宜的生长期,以保证其感染能力。 2. 植物处理:将目标植物的组织经过表面消毒处理,然后将其切割成小片或小块,以增加接触面积。 3. 农杆菌感染:将培养好的农杆菌与植物组织接触,使其感染植物细胞。通常使用浸泡法或注...
下面是使用农杆菌介导同源重组法敲除真菌基因的步骤: 第一步:构建敲除载体 首先,需要构建一个用于敲除目标基因的质粒载体。该质粒至少包括以下组成部分: 1.目标基因的上下游同源片段:需要从真菌基因组中提取一段上游和下游同源片段,使其与要敲除的目标基因相连。同源片段可通过PCR扩增、限制性内切酶切割等方法获得。 2...
步骤三:将敲除载体转化到农杆菌 将构建好的敲除载体通过化学转化或电穿孔法将其转化到农杆菌中。化学转化法包括将敲除载体与农杆菌细胞一起处理化学物质,使其能够吸收到敲除载体。电穿孔法则是将敲除载体与农杆菌细胞一起置于电场中,利用电场的作用诱导敲除载体进入农杆菌细胞。 步骤四:农杆菌感染真菌 将转化好的农...
研究人员利用农杆菌介导法和花粉管通道法培育出转抗寒基因PgLCBF1的月季石榴,主要过程示意图如下。请回答下列问题:(1)过程①是___(填步骤名称),用限制酶XbaⅠ分别切割质-e卷通组卷网
刷刷题APP(shuashuati.com)是专业的大学生刷题搜题拍题答疑工具,刷刷题提供农杆菌介导的Ti质粒载体转化法中的关键步骤是A.外植体选择与预培养B.外植体的农杆菌接种C.共培养(脱菌培养)D.选择培养以及转化植株再生的答案解析,刷刷题为用户提供专业的考试题库练习。一分钟