在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号...
通常,可以通过查阅文献或蛋白质数据库(如UniProt)来确认内参蛋白的分子量。 (4)生物学功能:理想的内参蛋白应参与细胞的基本生物学过程,如细胞结构(如β-actin、γ-tubulin)或代谢(如GAPDH)等。 (5)目标蛋白细胞内表达部位:不同细胞类型或组织中内参蛋白的表达量可能不同,根据目标蛋白在细胞内的表达部位可选择不同...
内参检测的时候加。在WB实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等常规步骤以外，还需要极其关键的一步，那就是内参检测，通过内参蛋白的表达量作为参照，校正蛋白定量和上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
内参抗体,又称为对照抗体,是针对于内参蛋白进行检测的一类抗体,用于在实验中提供参照。内参蛋白通常是指在不同样本中表达水平相对恒定的蛋白质,例如GAPDH,β-actin,α-tubulin等等,帮助校正样品之间的差异,用于标准化实验条件并确保实验结果的可比性。 标签抗体,通常是指针对于重组蛋白上连接的标签蛋白进行检测的抗体。...
研究内容不一样,WB内参选择有差别,别做什么蛋白都选GAPDH 前段时间曾经给大家介绍过组织、细胞中提取蛋白质的基本方法、注意事项及在选择不同类型裂解液时,结果出现的偏差。在提取蛋白的时候,总发现提取的蛋白量很少,这样就得好好排查下每个环节可能出现的问题,尤其得考虑,裂解液是否合适? 接下来,跟大家聊聊挑选WB...
当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H)，或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B 以上信息来自百度搜索。
说明目的条带在经过处理后是表达减少的趋势我的理解是 定蛋白的时候测的是总蛋白的浓度 但是处理组中你的目的蛋白变少了 假设你选的这个内参蛋白没有变化的话 那么同样上样量的wb 内参的占比就是会比对照组高 赞(1) 回复 上进少女乐乐酱 2022-07-07 22:21:38 但是要是这个结果和你预想的不太一样的话...
1、作为病情参照指标，当HSP70达到高峰时，说明溃疡最严重；2、预示病人治愈可能性，HSP70表达越强，说明病人存活可能性越大（仅做参考）
在WB实验的时候发现，用一批样本跑的同一块胶分别敷actin、H3、PCNA、LaminB1，后三个是核内参，actin...
我想检测我的目标蛋白在不同组织的表达量，组织是脑、肺、肝、心、脾、大肠、肌肉、骨骼。应该用什么...