全血RNA提取步骤 1.试剂准备: a.梯度离心管:使用1.5mL或2mL的离心试管,也可以使用96孔板。 b.溶解缓冲液:使用含有酮糖、胱氨酸和EDTA的溶液。 c.溶液添加剂:包括蛋白酶、盐酸和异硫氰酸草酰胺。 d.RNase Free水:用于稀释试剂和洗涤的水。 e.异丙醇:用于沉淀RNA。 f.洗涤缓冲液:使用具有酒精干燥剂的净化...
一、全血提取RNA的步骤: 1. 样本采集: a. 使用无菌技术,采集全血样本,并将其转移到无菌离心管中; b. 保持样本无菌,避免污染。 2. 血浆分离: a. 将全血样本离心,将血浆和混浊的细胞沉淀分离开; b. 小心地将血浆转移到新的离心管中。 3. 细胞沉淀处理: a. 将细胞沉淀洗涤,去除血浆中的残留细胞; b. 加...
11 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-80℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。12 如果提取全血>0.5 ml或者>2x106白细胞,加30-50μl RNase free water重复步骤11,可以得到更多的RNA,或者...
Trizol法提取全血总RNA 实验前准备: Trizol,氯仿,异丙醇,75%乙醇(用RNase—Free水配制),RNase—Free水,柠檬酸钠抗凝管. 1ml注射器,1.5、3mlEP管(DEPC处理过),大、中、小号枪头(DEPC处理) 150~250ul全血 加入10倍体积TRIzol(主要是异硫氰酸胍)(1.5ml~2。5ml),充分吹打混匀,室温静置5min (使核酸蛋白复合...
操作步骤 1. 请自行准备:无水乙醇、无 RNA 酶的 15mL 离心管。 2. 取出洗涤液,按以下操作: 洗涤液:10mL 加入 24mL 无水乙醇,混匀;20mL 加入 48mL 无水乙醇,混匀。 3. 取 15mL 无 RNA 酶离心管(自备)1 支,加入 2mL 裂解液,再加入 2mL 已经解冻或新鲜的血液,(冷藏血液需先轻振混匀后再加入), ...
磁珠法全血总RNA提取详细步骤及方法 注意事项: ◆样品应避免反复冻融,否则会导致提取的RNA降解且提取量也下降; ◆需要自备材料:无水乙醇、PBS缓冲液、磁铁或磁架、无RNase离心管; ◆整个过程请勿离心,以免磁珠不可逆聚集而影响提取效果。 ◆已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃储存不超过3天(推荐使用EDTA作为抗凝剂...
磁珠法全血总RNA提取详细步骤及方法 注意事项: ◆样品应避免反复冻融,否则会导致提取的RNA降解且提取量也下降; ◆需要自备材料:无水乙醇、PBS缓冲液、磁铁或磁架、无RNase离心管; ◆整个过程请勿离心,以免磁珠不可逆聚集而影响提取效果。 ◆已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃储存不超过3天(推荐使用EDTA作为抗凝剂...
1、Trizol法提取全血总RNA实验前准备:Trizol,氯仿,异丙醇,75%乙醇(用RNase-Free水配制),RNase-Free水,柠檬酸钠抗凝管。1ml注射器,1.5、3 ml EP管(DEPC处理过),大、中、小号枪头(DEPC处理)150250 ul全血加入10倍体积TRIzol(主要是异硫氰酸胍)(1.5 ml2.5 ml),充分吹打混匀,室温静置5min(使核酸蛋白复合物完全...
磁珠法全血总RNA 提取详细步骤及方法 注意事项: ◆ 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的RNA 降解且提取量也下降; ◆ 需要自备材料:无水乙醇、PBS 缓冲液、磁铁或磁架、无RNase 离心管; ◆ 整个过程请勿离心,以免磁珠不可逆聚集而影响提取效果。 ◆ 已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃储存不超过3 天(推荐使用...
◎RNA 提取得率高,可在 2mL 的全血中提取 50μg 以上基 因组 RNA;◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂,安全无毒。操作步骤 1. 请自行准备:无水乙醇、无 RNA 酶的 15mL 离心管。2. 取出洗涤液,按以下操作:洗涤液:10mL 加入 24mL 无水乙醇,混匀;20mL 加入 48mL 无水乙醇,混匀。3. 取 ...