电镜水平的免疫金染色法 应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原标记,如需穿透细胞膜,则需辅以冻融法或加入Triton X-100、皂素等活性剂,后者会加重细胞超微结构的破坏,因此,现较普遍采用包埋后染色,现分别介绍如下: 1.包埋后染色 (1)超薄切片厚50~70nm左右
胶体金标记二抗需按粒径选择。5nm金颗粒分辨率高但信号弱,适合高表达抗原;15-20nm颗粒信号强但穿透性差,适用于表面抗原。二抗工作浓度一般为1:20,室温孵育1小时。孵育后再次用TBS和双蒸水交替清洗,去除未结合的金颗粒。为增强对比度,可用醋酸铀和柠檬酸铅双重染色各5分钟,铅染时需隔绝二氧化碳防止沉淀。 电镜观察...
国际标准分类中,免疫金 电镜涉及到微生物学、农业和林业、实验室医学、电磁兼容性(EMC)、道路车辆装置、医疗设备、肉、肉制品和其他动物类食品、兽医学、食品试验和分析的一般方法、水果、蔬菜及其制品、分析化学、饲料、电气工程综合、杀虫剂和其他农用化工产品、农业机械、工具和设备、肥料、谷物、豆类及其制品、技术...
(9)置网于胶体金标记抗体液1:30～1:100,淡红色为适宜稀释度,室温,1min～1h; (10)双蒸水洗3次,每次3min。 如作双重染色,则应将镍网翻过来,在另一面,用另一类抗体血清,重复上述步骤(2)～(10); (11)5%醋酸铀(双蒸水配制),染色5min,双蒸水洗净; (12)枸橼酸铅染色5min,双蒸水洗净; (13)电镜观察。
免疫金法用于电镜技术时,具体流程因染色与包埋处理顺序不同分为两类。 1. **包埋前染色**:在样品包埋前直接对组织进行免疫金标记,适用于抗原位于较易渗透区域的情况,但可能因后续包埋步骤导致结构破坏。 2. **包埋后染色**:先对样品进行包埋、切片处理,再对切片进行免疫金标记,能更好保存超微结构,但需试剂穿透...
在外泌体透射电镜检测基础上,引入免疫学概念,利用外泌体膜蛋白的抗体对外泌体进行免疫标记,再利用胶体金二抗指示出抗原的位置。胶体金在电镜下呈现出粒径均一、质地均匀的黑色颗粒,这样同时从形态学及免疫学上鉴定外泌体。这样实验结果中既可以获得经典形态的外泌体,又可以直观地观察到外泌体表面所携带的蛋白位置...
可分为包埋前、包埋后及冷冻超薄切片免疫电镜技术。本 2 结果和讨论 文仅介绍包埋前免疫金电镜标记在使用过程中的一些难 点及解决方法。 2.1 电镜下肝细胞结构 肝细胞结构清晰,金颗粒标于肝细胞的内质网上 1材料和方法 (附图)。 心肌、肾、神经、皮肤、直肠癌、淋巴瘤均为患者的手术 标本,肝组织为小鼠。所有...
包埋前免疫金电镜标记的使用难点及解决方法,包埋前免疫金电镜标记的使用难点及解决方法使用,应用,标记,免疫标记,免疫电镜,难点及,电镜免疫金,标记的,包埋前,金标记方法,使..
外泌体免疫胶体金电镜技术服务,外泌体免疫胶体金电镜技术是在常规电镜负染色基础上,加入抗原抗体反应,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原。,武汉迈斯普生物科技有限公司
The prospects of colloidalgold immunoelectron microscopy technique were discussed in this paper .Key words: colloidal gold i mmunoelectron microscopy technique; tumor; virus 20世纪人们将电镜技术与免疫学方法相结合 ,逐步形成了免疫电镜检查术。1971年 , Faulk和 Taylor的结果。1983年 , Holgate等金染色与...