Clone Nestin 20的免疫荧光。在甲醇固定的小鼠胚胎细胞上,Nestin被染成红色,Vimentin被染成绿色。照片由西北大学R. Goldman博士提供。 免疫组织化学(IHC) 免疫组织化学最常对组织样本进行,这些样本要么冷冻在冻存介质中,例如最佳切割温度(OCT)化合物,要么固定在中性福尔马林中...
组织多色免疫荧光的基本原理是利用荧光染料标记抗体或其他分子,然后将其与待检测的样品进行反应,通过荧光显微镜观察标记物的分布情况,从而实现对样品中多种分子或细胞的同时检测。这种技术利用了抗原抗体反应的高度特异性和荧光染料的荧光效应,使得不同的抗原抗体结合物在荧光显微镜下能够呈现出不同的颜色和亮度,从而实现...
01.请问一下膜蛋白的细胞免疫荧光实验有哪些注意事项呢? 与常规胞浆蛋白相比,膜蛋白先需要确定与抗体识别区域是胞内还是胞外,如果是胞外,就不需要破膜打孔,如果是胞内,则需要破膜。 02.骨组织在包埋前需要长期保存的话,储存条件是什么? 先脱钙脱水固定后再用缓冲液4℃保存,或是脱钙后直接冰冻包埋-80℃冷冻。
免疫组化和免疫荧光都经过免疫原,原理相似,只是显色剂不同,免疫荧光是免疫组化技术之一。 1、免疫组化是应用免疫学的基本原理,即抗原和抗体特异性结合的原理,通过化学反应确定组织细胞中的抗原,使标记有抗体的显色试剂显色,并对其进行定位、定性和相对定量研究。在免疫组化过程中,常用的显示剂包括荧光素、酶、金属...
一、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC) 1、原理和特点 原理:利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的标记技术,通过化学反应使标记抗体显色,对组织细胞内的特异性抗原进行定位、定性、定量检测的一门技术。 特点:免疫组化具有操作简单,特异性强,敏感性高,定位准确,形态与功能相结合等特点。
这篇是写石蜡切片的免疫组化和免疫荧光~~~ 之前做了冰冻切片,最近在做石蜡切片,我的石蜡切片都是让公司十块钱一个进行包埋,然后自己切的,也可以直接让公司给你切,至于石蜡和冰冻的区别如下 切片:1.切片前一晚把蜡块冻在-30过夜,这样第二天切的话就比较好切 ...
immunofluorescence | IF | IHC | 免疫荧光 这是最传统的细胞生物学手段,首先构建一个mouse的in vivo模型,然后就是切片,然后染色,直接用眼睛看,在顶刊上经常能看到一些非常漂亮的彩图,既美观又真实。 在医院里,这一类被叫做pathologist,通常就是医生初步诊断后,然后就靠pathologist来做分子诊断,IHC,然后基因型检测,...
针对不同的实验应用,需要考虑二抗所偶联的标记物,如HRP、Biotin、荧光素等标记物。WB与IHC所用的二抗,所带的标记物主要选择HRP和Biotin,而免疫荧光和流式应用可根据实验设计的需要,选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等。做western blot最常用的二抗是hrp标记的二抗。
IHC用的组织样本一般会做成组织切片,ICC用的细胞样本会坐成细胞爬片。利用的指示剂剂都是化学显色剂,需要的是酶促发光。而IF则属于免疫荧光检测了,是免疫沉淀技术与荧光标记技术结合的检测技术,利用的是荧光基团来指示检测结果。靠的是仪器发送激发光来显色观察。IF的样本也是分为细胞和组织,所以更规范来说,我觉得...
免疫荧光（IF）是IHC和ICC的增强版，它使用荧光标记，可以实现多目标蛋白的共定位分析，尤其适合亚细胞级别的研究。IF技术根据标记物的不同，可以分为直接法和间接法，前者直接加标记抗体，后者则先用未标记抗体与样本反应，再加荧光标记的抗体。在选择这些技术时，要考虑样本类型（组织或细胞）、特异性、...