2. 应用拓展:IF技术将在更多领域得到应用,如生物医学、病理学、细胞生物学等;同时,与其他技术(如显微镜成像、蛋白质组学等)相结合,实现多参数、高通量的分析。3. 产业化应用:IF技术在生物检测中的应用前景广阔,有望为我国生物医药、食品安全等领域的发展贡献力量。4. 数据处理与分析:针对IF检测过程中产生...
免疫荧光染色技术是一种以免疫学为基础,结合生物化学技术和显微技术发展而来的蛋白等分子检测技术。 被广泛应用于细胞生物学、微生物学、寄生虫学、免疫学等科学研究,以及临床诊断方面。 一、IF质量影响因素分析 以下将从荧光染料、抗体、样品前处理、染色过程等方面阐述如何提高免疫荧光染色的质量,以获得高清晰度的图片。
最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。 由于操作步骤比较多,同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别,所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果,除了需要高质量的抗体,以及对实验条件进行反复优...
2. 样品和试剂的存储:由于IF中所用抗体和实验样品的荧光性质,因此必须适当存储。最好将荧光抗体和经过IF处理的样品都保存在完全黑暗的环境中。使用琥珀色或铝箔覆盖抗体管。 Sample and reagent storage: Due to the fluorescent nature of the antibodies used and the samples produced for IF, it is essential ...
免疫荧光(Immunofluorescence,IF)是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一种强大的技术。 它的原理是利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内的特定抗原进行定位和定性的分析。IF是一个很好的检测技术工具,用于研究感兴趣的产物如分子、蛋白质或糖蛋白的表达、定位、分布和迁移。
免疫荧光 (IF)可用来分析、比较单一样品中的多个蛋白的表达模式。采用 IF 进行多重分析的方法有多种,包括直接检测法、间接检测法、顺序标记策略,您可以根据实验目的选择合适的方法,甚至可以将这些方法进行组合。 ►►► 基于宿主的多重分析 基于宿主...
一、免疫荧光的原理 免疫荧光(Immunofluorescence,IF)技术是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体...
由于操作步骤比较多,同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别,所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果,除了需要高质量的抗体,以及对实验条件进行反复优化外,还必须设立严谨的实验对照。 总之,免疫荧光实验从细胞样品处理、固定、封闭、抗体孵育到最后的封片及观察拍照,每步都非常关键,需要严格控...
图1:结果显示,在WB中特异检测出清晰干净的条带,并不能充分确保该抗体在IF分析中也有良好性能和可靠性。使用 α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb #4179 或另一知名公司的 α-突触核蛋白抗体对小鼠和大鼠脑细胞的提取物进行WB分析(左图),表现均佳。使用CST的 ...
显然,固定剂确实影响到蛋白(抗原)的亚细胞定位实验结果。不同固定剂的作用原理不同,不同靶蛋白及所用抗体特性不同,都可能影响到固定剂使用效果。因此选对合适的固定剂对一个准确可靠的IF结果是至关重要的。 上面与预期结果不一致的小伙伴其实就是因为采用了乙醇固定才导致了非特异性着色结果,前人的研究中均采用的...