免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光...
免疫荧光方法 免疫荧光方法,一种快速诊断微生物的检验方法。将荧光素和抗体在一定条件下结合成为荧光抗体,在荧光显微镜下观察,如有相应抗原物质存在,则存在部位可出现荧光。此法可用于各种病原微生物的快速诊断。
免疫荧光检查(immunofluorescence examination)是将荧光素与抗体连接成荧光抗体,再与待检标本中的抗原反应,将反应物置荧光显微镜下观察抗原抗体复合物散发的荧光,借此对标本中的抗原进行鉴定和定位。原理 将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合,检查特异蛋白抗原在组织或细胞内分布的方法。由于荧光素所发...
1、细胞膜上的免疫荧光检测法 间接标记法 1) 制备单细胞悬液; 2) 细胞计数,取出 1× 106 个细胞于试管中; 3) 用台盼蓝染色计活细胞数,要求活细胞数 >90 ~ 95%; 4) 在试管中加入一抗,(剂量按照说明书的要求),孵育 30 ~ 60 分钟; 5) PBS 洗涤 1 ~ 2 次, 1500rpm,离心 3 分钟,弃上清; ...
直接免疫荧光法中的一抗和间接免疫荧光法中的二抗都是荧光抗体,因此在这些抗体孵育的时候必须注意避光。此外,为保证结合质量和防止干燥,抗体孵育应尽量在湿盒中进行。 (五)封片及荧光观察 标记好荧光的细胞片原则上可以直接进行观察,特别是有时候封片不当反而使得前功尽弃。但在绝大多数情况下,为了保存结果,以便进一...
免疫荧光法依赖于抗原与抗体的特异性结合。在免疫细胞化学中,荧光标记的抗体与靶分子结合后,可以通过激发荧光,从而使得靶分子在细胞或组织中可见。这种荧光标记可以通过直接结合或间接结合实现。 直接结合法是将荧光染料直接与抗体结合,制备成荧光标记的抗体。这种方法操作简单,适合用于单一标记物的检测,但可能导致染色反应...
免疫荧光(Immunofluoresccence):简称IF,与western blotting一样,也是根据抗原抗体反应的原理,将不影响抗原抗体活性的免疫荧光色素标记在抗体或抗原上,与其相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下观察,从而确定抗原或抗体的性质和定位,包括直接法和间接法。 一、直接...
免疫荧光法是在免疫原理的基础上开发出来的一种以特异性抗体为指示物的高敏感度检测方法,它能够检测膜结构蛋白的定位、蛋白质的表达水平及生物化学变化过程、蛋白质的交互作用、细胞周期变化、细胞表面活性等多种信息。由于抗体的特异性,免疫荧光法可以迅速准确地检测指定的分子,可以检测微量的分子,灵敏度很高。 免疫荧...
皮肤直接免疫荧光检查法 适应证 皮肤直接免疫荧光检查法适用于:1.非感染性大疱性皮肤病如各型天疱疮、类天疱疮、疱疹样皮炎、线状IgA大疱性皮肤病、获得性大疱性表皮松解症等。2.结缔组织病如红斑狼疮等。3.各种血管炎。4.某些感染性皮肤病。5.皮肤肿瘤等。禁忌证 严重瘢痕体质者(尤其是特殊部位)应慎重,...