ANXA2基因在人肝癌细胞中高表达,为了研究膜联蛋白A 2(ANXA2) 基因表达水平对人肝癌细胞中细胞骨架微丝F-actin表达的影响, 采用已优化转染条件的磷酸钙法将ANXA2特异性性干扰重组质粒pU6H1-GFP-siANXA2导入人肝癌细胞SMMC-7721,分别在转染后96hrs和120hrs对SMMC-7721细胞进行F-actin免疫荧光染色,应用激光共聚焦...
细胞骨架是维持真核细胞形态及参与一系列细胞生物学功能的重要细胞器,微丝属于其中的重要成员,其中又以肌动蛋白(actin)纤维作为主要成分。细胞中的肌动蛋白以网络状分布于胞质中,大多数细胞均呈高表达。采用人actin或tubulin的单克隆抗体结合该抗原,再使用FITC和Rhodamine标记的山羊抗小鼠二抗与一抗结合,最终细胞中...
•抗体:识别细胞骨架蛋白的特异性抗体,如抗α-tubulin、抗β-actin等。•固定液:用于固定细胞,常用的是4%甲醛溶液。•清洗液:用于清洗细胞培养板和爬片,可用PBS或去离子水。•封片剂:用于封存荧光染色的细胞,可用抗荧光淬灭剂或甘油等。实验所需试剂 无血清培养基 用于维持细胞生长,不添加血清,避免...
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掌握免疫荧光细胞化学染色法的原理及操作步骤。掌握用间接免疫荧光细胞化学染色法显示目前抗原的方法。【实验原理】细胞骨架是维持真核细胞形态及参与一系列细胞生物学功能的重要细胞器,微丝属于其中的重要成员,其中又以肌动蛋白(actin)纤维作为主要成分。细胞中的肌动蛋白以网络状分布于胞质中,大多数细胞均呈高表达...